Anticorps Monoclonal Anti-Souris CD117/c-Kit Biotinylé pour Cytométrie en Flux - P05532

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du CD117/c-Kit

• Le récepteur du facteur de croissance des mastocytes/cellules souches Kit (CD117/c-Kit) est une tyrosine-protéine kinase transmembranaire de type III codée par le proto-oncogène Kit, servant de récepteur à la cytokine KITLG/SCF.
• Lors de la liaison du ligand, Kit active plusieurs voies de signalisation en aval, y compris les cascades PI3K/AKT, RAS/MAPK et JAK/STAT, pour réguler la survie cellulaire, la prolifération et la différenciation.
• Kit joue des rôles essentiels dans l'hématopoïèse, le maintien des cellules souches, la gamétogenèse, le développement, la migration et la fonction des mastocytes, ainsi que la mélanogenèse.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes avec des distributions tissulaires distinctes : l'isoforme 1 est largement exprimée, tandis que l'isoforme 3 est enrichie dans les cellules souches hématopoïétiques.
• À l'échelle subcellulaire, Kit est principalement situé sur la membrane cellulaire, mais subit une internalisation et une localisation cytoplasmique suite à son activation.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation N-liée et la phosphorylation dépendante du ligand sur des résidus tyrosine clés, qui sont cruciales pour l'activité kinase et la propagation du signal.
• En tant que proto-oncogène, les mutations activatrices et l'expression dysrégulée de KIT sont impliquées dans diverses tumeurs malignes, soulignant son importance en tant que cible thérapeutique.

Conseils Expérimentaux et Techniques

• L'immunogène couvre le domaine extracellulaire (acides aminés 25–523) du CD117/c-Kit de souris, suggérant que l'anticorps convient pour détecter le récepteur exprimé en surface lors de la cytométrie en flux sur cellules vivantes.
• Pour la cytométrie en flux, associez cet anticorps primaire biotinylé à un réactif secondaire streptavidine conjugué à un fluorophore ; titrez les deux pour obtenir un indice de coloration optimal pour votre type cellulaire spécifique.
• Incluez des témoins appropriés tels qu'un anticorps biotinylé de même isotype et, si disponible, des cellules de souris Kit-knockout ou un blocage avec du KITLG/SCF recombinant pour confirmer la spécificité.
• Envisagez de tester la réactivité croisée avec l'humain ou d'autres espèces si nécessaire, mais notez que cet anticorps est signalé comme réagissant avec la souris ; la validation dans d'autres espèces relève de la responsabilité de l'utilisateur.
• Bien que non répertorié, l'anticorps peut fonctionner dans d'autres applications telles que l'immunohistochimie ou l'immunoprécipitation ; les performances doivent être validées empiriquement dans le système d'échantillon pertinent.

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