Anticorps monoclonal biotinylé anti-HLA-DR pour cytométrie en flux - P01903

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la chaîne alpha HLA-DR

• HLA-DRA code pour la chaîne alpha des molécules de MHC de classe II, qui s'associe à la chaîne bêta (HLA-DRB) pour former des hétérodimères HLA-DR fonctionnels à la surface cellulaire.
• En complexe avec HLA-DRB, il présente des peptides antigéniques sur les cellules présentatrices d'antigènes professionnelles (CPA) pour la reconnaissance par les lymphocytes T CD4+, guidant les fonctions effectrices des lymphocytes T auxiliaires telles que la réponse immunitaire médiée par les anticorps et l'activation des macrophages. Références associées : PMID:15265931, PMID:15322540, PMID:17334368
• Il présente généralement des antigènes peptidiques extracellulaires de 10 à 30 acides aminés issus de la protéolyse d'antigènes endocytés dans les lysosomes. Références associées : PMID:8145819
• Dans le microenvironnement tumoral, il présente des peptides antigéniques principalement générés par phagocytose de cellules tumorales apoptotiques ou macropinocytose de protéines tumorales sécrétées. Références associées : PMID:31495665
• Il présente des peptides dérivés de protéines intracellulaires piégées dans les autolysosomes après macroautophagie, un mécanisme particulièrement important pour la sélection des lymphocytes T dans le thymus et la tolérance immune centrale. Références associées : PMID:17182262, PMID:23783831
• La sélection des épitopes immunodominants suit deux modes de traitement : « lier d'abord, couper/tailler plus tard » pour les peptides dérivés de pathogènes et « couper d'abord, lier plus tard » pour les autoantigènes/peptides propres, avec un grand résidu d'ancrage hydrophobe à la position 1 du peptide essentiel pour une interaction de haute affinité avec le MHC de classe II. Références associées : PMID:25413013, PMID:8145819
• Il se localise sur la membrane cellulaire et sur les membranes des compartiments endocytiques, notamment les endosomes précoces, les endosomes tardifs, les lysosomes et les autolysosomes, ce qui est cohérent avec son rôle dans le traitement et la présentation des antigènes.
• Il est exprimé dans les CPA professionnelles telles que les macrophages, les cellules dendritiques et les lymphocytes B, ainsi que dans les cellules épithéliales thymiques.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps monoclonal conjugué à la biotine est adapté à la détection directe par cytométrie en flux du HLA-DR sur les CPA humaines et cynomolgues, sans avoir besoin d'une paire d'anticorps primaire-secondaire.
• Validez l'anticorps dans votre système d'échantillon spécifique, car les niveaux d'expression du HLA-DR peuvent varier selon le type cellulaire, l'état d'activation et le contexte pathologique.
• Pour la cytométrie en flux multicolore, assurez la compatibilité du fluorophore conjugué à la streptavidine avec les autres fluorophores de votre panel pour éviter le recouvrement spectral.
• L'immunogène étant une protéine recombinante, l'anticorps peut cibler un épitope conformationnel ; prenez cela en compte si vous utilisez des techniques dénaturantes (par exemple, immunoblotting dans des conditions réductrices).

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