Anticorps polyclonal de lapin anti-ATP6V1A pour WB, ELISA - P38606

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ATP6V1A

• L'ATP6V1A code pour la sous-unité catalytique A du domaine V1 de la H+-ATPase vacuolaire (V-ATPase), une enzyme multisuinique qui couple l'hydrolyse de l'ATP à la translocation des protons (PMID:8463241, PMID:22053050). Les noms alternatifs connus incluent la sous-unité 69 kDa de la V-ATPase, l'isoforme VA68 de l'ATPase vacuolaire et la sous-unité alpha de la pompe à protons vacuolaire. Références associées : PMID:8463241 PMID:22053050

• Le complexe V-ATPase est essentiel pour l'acidification et le maintien du pH des compartiments intracellulaires, et dans certains types cellulaires, il se localise au niveau de la membrane plasmique pour favoriser l'acidification extracellulaire (PMID:32001091). Références associées : PMID:32001091

• Sur la membrane lysosomale, la V-ATPase active mTORC1 en favorisant l'activité du facteur d'échange de nucléotides guanine du complexe Ragulator (PMID:22053050). Références associées : PMID:22053050

• Dans des conditions aérobies, l'ATP6V1A contribue à l'homéostasie intracellulaire du fer en déclenchant l'activité des enzymes prolyl hydroxylases (PHD) Fe(2+), qui hydroxylent HIF1A et le marquent pour une dégradation protéasomale (PMID:28296633). Références associées : PMID:28296633

• La protéine pourrait jouer un rôle dans le développement des neurites et la connectivité synaptique (PMID:29668857). Références associées : PMID:29668857

• L'ATP6V1A est principalement cytosolique mais se localise également dans les vésicules recouvertes de clathrine, les vésicules sécrétoires et les membranes lysosomales.

• Une expression protéique élevée est observée dans la peau. Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation et la phosphorylation, et l'épissage alternatif génère plusieurs isoformes. Le gène est associé à des maladies telles que l'épilepsie.

• Lors d'une infection par le virus de la rage, l'ATP6V1A facilite le décapsidation du virion en interagissant avec les protéines de matrice virale M.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 500–600 de l'ATP6V1A humaine (NP_001681.2). Cette région peut être conservée entre les espèces, ce qui concorde avec la réactivité croisée rapportée chez la souris.

• Pour le Western blot, une bande migrant près de 68 kDa est attendue. Validez la spécificité de l'anticorps en utilisant des contrôles de type knockdown ou knockout dans le système cellulaire ou tissulaire pertinent.

• Les conditions ELISA doivent être optimisées avec des protéines ATP6V1A recombinantes ou des standards peptidiques, et la liaison non spécifique peut être réduite avec des tampons de blocage appropriés.

• Étant donné que la V-ATPase est exprimée de manière ubiquitaire mais enrichie dans la peau, les lysats de kératinocytes ou de fibroblastes humains peuvent servir de contrôles positifs.

• Si vous étendez l'utilisation à l'IHC ou à l'IF, tenez compte de l'épitope cible de l'anticorps dans un contexte de protéine repliée et vérifiez les performances dans des conditions natives.

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