Anticorps polyclonal de lapin ATF6 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P18850

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'ATF6

• ATF6 est un précurseur de facteur de transcription intégré à la membrane du réticulum endoplasmique (RE). Le stress du RE déclenche son clivage protéolytique, libérant le fragment N-terminal actif qui se transloque dans le noyau pour initier la réponse aux protéines dépliées (UPR). Références associées : PMID:10564271 PMID:11158310 PMID:11779464
• ATF6 clivé se lie aux éléments de réponse au stress du RE (ERSE, 5'-CCAAT-N₉-CCAC[GA]-3' et ERSE II, 5'-ATTGG-N-CCACG-3') sous forme d'hétérodimère avec NF-Y, activant les gènes cibles de l'UPR. Références associées : PMID:10564271 PMID:11158310 PMID:11779464 PMID:11163209
• ATF6 peut également réguler la transcription médiée par le facteur de réponse sérum et jouer un rôle dans le développement de la fovéa rétinienne et la fonction des cônes. Références associées : PMID:10564271 PMID:11158310 PMID:11779464 PMID:26029869
• Localisation subcellulaire : Le précurseur réside dans les membranes du RE et de l'appareil de Golgi ; après traitement, le domaine facteur de transcription se localise dans le noyau.
• ATF6 est exprimé de manière ubiquitaire dans tous les tissus humains.
• Le précurseur est une glycoprotéine liée au N et peut être modifié par ubiquitination. La protéine est une protéine membranaire de type II à passage unique (ancre de signal) dont l'extrémité N est orientée vers le cytoplasme et l'extrémité C dans la lumière du RE.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à un peptide situé entre les acides aminés 600-670 de l'ATF6 humain (NP_031374.2), dans le domaine luminal C-terminal. Cette région est présente dans le précurseur de pleine longueur (~75 kDa). La détection de la forme nucléaire clivée (~50 kDa) peut varier en fonction de l'accessibilité de l'épitope ; validez-la dans des modèles de stress du RE appropriés.
• Pour le Western blot, une bande proche de 75 kDa est attendue pour le précurseur. Traitez les cellules avec des inducteurs de stress du RE (par exemple, tunicamycine, thapsigargine) pour observer le clivage et la translocation nucléaire.
• Pour IHC-P, envisagez une récupération d'antigène avec du tampon citrate ou EDTA, et confirmez la spécificité du signal avec des contrôles adéquats.
• En IF/ICC, ATF6 présente un motif réticulaire RE/Golgi dans des conditions basales et se redistribue vers le noyau après induction du stress ; utilisez une fixation et une perméabilisation appropriées.
• Pour ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; optimisez les conditions de revêtement et de blocage.

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