Anticorps polyclonal de lapin ATF1 pour WB, IP, ELISA - P18846

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'ATF-1

• ATF-1 (Activating Transcription Factor 1) est un facteur de transcription dépendant de l'AMP cyclique codé par le gène ATF1, appartenant à la famille CREB/ATF des facteurs de transcription à domaine basique à leucine zipper (bZIP).
• Il se lie à l'élément de réponse à l'AMPc (CRE ; consensus 5'-GTGACGT[AC][AG]-3') présent dans de nombreux promoteurs viraux et cellulaires, ainsi qu'à l'élément sensible à Tax (TRE) du HTLV-I.
• ATF-1 médie la stimulation induite par la protéine kinase A (PKA) des gènes rapporteurs à CRE, reliant la signalisation de l'AMPc à l'expression génique.
• Il agit comme répresseur transcriptionnel des gènes de détoxication antioxydante tels que FTH1, ce qui l'implique dans les réponses au stress oxydatif.
• ATF-1 déclenche la prolifération et la transformation cellulaire, et est impliqué dans des réarrangements chromosomiques dans les pathologies malignes (par exemple, les fusions EWS-ATF1 et FUS/ATF-1).
• La protéine est localisée exclusivement dans le noyau, ce qui est cohérent avec son rôle de facteur de transcription.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation (phosphoprotéine) et l'ubiquitination (conjugaison Ubl), et il subit un épissage alternatif.
• Les mots-clés Uniprot mettent en évidence ses fonctions : liaison à l'ADN, activateur, régulation de la transcription, et son implication dans les réarrangements chromosomiques.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé était une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 1-210 de l'ATF1 humain, qui inclut la région N-terminale. Cette région est bien conservée et peut convenir pour détecter la protéine ATF-1 totale, mais la réactivité croisée avec d'autres membres proches de la famille (comme CREB) doit être évaluée par alignement de séquences.
• Pour le Western blotting (WB), le poids moléculaire prédit est de 29 kDa ; pensez à utiliser des pourcentages de gel et des contrôles de charge appropriés. Validez la spécificité à l'aide de lignées cellulaires pertinentes (par exemple HeLa, HEK293) et de tissus de souris.
• Pour l'immunoprécipitation (IP), assurez la stabilité du complexe anticorps-antigène ; testez différentes conditions de tampon de lyse pour conserver les interactions protéiques.
• En ELISA, l'utilisation d'un standard peptidique ou protéique peut aider à quantifier les niveaux d'ATF-1 ; vérifiez la linéarité et la sensibilité.

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