Anticorps polyclonal de lapin ASC/TMS1 pour WB, IF, IHC-P, ELISA - Q9ULZ3

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'ASC/TMS1

• ASC/TMS1 (protéine speck-like associée à l'apoptose contenant un domaine CARD), également connu sous le nom de PYCARD, CARD5 ou TMS-1, est une protéine adaptatrice de 22 kDa composée d'un domaine pyrine N-terminal (PYD) et d'un domaine de recrutement de caspase C-terminal (CARD).
• Il agit comme échafaudage central de l'inflammasome, reliant les senseurs NLR (NLRP1, NLRP3, NLRC4) ou AIM2 à la procaspase-1, induisant ainsi l'activation de la caspase-1, la maturation de l'IL-1β et de l'IL-18, et la mort cellulaire par pyroptose. Références associées : PMID:15030775, PMID:16982856, PMID:17349957, PMID:24630722
• ASC médie l'apoptose en favorisant le clivage de BID dépendant de la caspase-8, la translocation mitochondriale de BAX et l'activation ultérieure des caspase-9 et -3, souvent indépendamment de FADD. Références associées : PMID:11103777, PMID:12646168, PMID:14730312, PMID:16964285
• Dans le noyau, ASC peut moduler la signalisation NF-κB en inhibant le complexe IKK et en entrant en compétition avec RIPK2, ajustant ainsi finement l'expression des gènes inflammatoires. Références associées : PMID:12486103, PMID:16585594
• ASC se localise dans de multiples compartiments sous-cellulaires, notamment le cytoplasme, les speck de l'inflammasome, le réticulum endoplasmique, les mitochondries, le noyau et l'appareil de Golgi, ce qui est cohérent avec ses rôles variés dans la signalisation immunitaire et l'apoptose.
• Il est largement exprimé à faible niveau, avec une abondance plus élevée dans les leucocytes sanguins périphériques, le poumon, l'intestin grêle, la rate, le thymus et le côlon. Son expression est souvent silencieuse par méthylation du promoteur dans les tumeurs, ce qui correspond à son activité suppresseur de tumeur rapportée. Références associées : PMID:23229815
• ASC est soumis à des modifications post-traductionnelles régulatrices, notamment l'ubiquitination et la phosphorylation, qui contrôlent l'assemblage de l'inflammasome et l'intensité du signal.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre la région centrale (aa 50–195) reliant les domaines PYD et CARD, ce qui peut conférer une réactivité à la fois contre l'ASC pleine longueur et les variants d'épissage ; il est recommandé de valider la spécificité par des contrôles de Knockdown ou de Knockout.
• En Western blot, une bande majoritaire d'environ 22 kDa est attendue ; utilisez des lysats de contrôle positif issus de cellules THP‑1 ou de cellules mononucléées sanguines périphériques humaines, et incluez des inhibiteurs de protéases pour minimiser la dégradation.
• Pour l'immunofluorescence et l'ICC, les agrégats en forme de speck sont une caractéristique des inflammasomes activés ; un co-marquage avec des anticorps contre NLRP3, AIM2 ou la caspase‑1 peut confirmer la formation de l'inflammasome. Les conditions de fixation et de perméabilisation doivent être optimisées en fonction du type cellulaire et de l'état d'activation.
• En IHC‑P (tissues inclus en paraffine), la récupération d'antigène dans un tampon citrate (pH 6,0) et le blocage des peroxydases endogènes sont recommandés ; les tissus présentant une inflammation connue (par exemple, côlon inflammé, amygdale) constituent des contrôles positifs adaptés.
• Pour les applications ELISA, l'association de cet anticorps polyclonal avec un anticorps monoclonal de capture peut améliorer le signal ; validez la linéarité et la spécificité du test avec la protéine ASC recombinante.
• Cet anticorps détecte l'ASC d'origine humaine, de souris et de rat ; cependant, la réactivité croisée peut varier selon le format du test, il est donc conseillé d'inclure une validation spécifique par espèce.

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