APOA1 Lapin pAb pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P02647

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'APOA1

• L'apolipoprotéine A-I (APOA1) est le composant protéique majeur des lipoprotéines de haute densité (HDL) plasmatiques et se trouve également dans les chylomicrons.
• Elle joue un rôle central dans le transport inverse du cholestérol en favorisant l'efflux du cholestérol à partir des tissus et en agissant comme cofacteur de la lécithine cholestérol acyltransférase (LCAT), facilitant l'estérification et l'élimination du cholestérol.
• En tant que partie du complexe de protéines activatrices des spermatozoïdes du plasma séminal (SPAP), l'APOA1 contribue à l'activation de la mobilité des spermatozoïdes.
• L'APOA1 est une protéine sécrétée synthétisée principalement dans le foie et l'intestin grêle, circulant dans le plasma en tant que composant des particules HDL.
• La protéine subit des modifications oxydatives aux positions Met-110 et Met-136 ; ces formes oxydées sont élevées chez les individus présentant un risque plus élevé de maladie coronarienne, y compris les porteurs du génotype eNOSa/b et les fumeurs, et sont enrichies dans les lésions aortiques avec l'augmentation de la gravité de la maladie.
• L'APOA1 appartient à une famille d'apolipoprotéines impliquées dans le transport et le métabolisme des lipides, avec des annotations la liant au métabolisme du cholestérol, au métabolisme des stéroïdes et à l'athérosclérose.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycation, la phosphorylation, la palmitoylation et la nitration, qui peuvent moduler sa fonction et ses rôles pathologiques dans l'amylose et la neuropathie.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la séquence de la protéine mature (acides aminés 25-267), couvrant une grande partie de l'APOA1 ; cette région est conservée chez l'humain, la souris et le rat, ce qui soutient la réactivité croisée signalée.
• Pour le transfert Western (Western blot), l'APOA1 est prédite pour migrer à environ 28 kDa, mais les modifications post-traductionnelles et l'association aux particules HDL peuvent provoquer des décalages ; validez la taille de la bande dans votre système d'échantillon en utilisant des témoins positifs appropriés (par exemple, plasma humain, lysats de foie).
• En immunohistochimie (IHC-P), l'APOA1 est principalement localisée dans l'espace extracellulaire et le cytoplasme des hépatocytes et des entérocytes ; optimisez la récupération de l'antigène et envisagez une co-coloration avec des marqueurs HDL pour confirmer la spécificité.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), notez que l'APOA1 est sécrétée ; la coloration intracellulaire peut refléter une protéine nouvellement synthétisée dans le réticulum endoplasmique/Appareil de Golgi ; utilisez des conditions sans sérum ou des expériences de marquage-poursuite (pulse-chase) pour améliorer la détection.
• L'anticorps a été validé pour ELISA ; en raison de sa nature polyclonale, il peut reconnaître plusieurs épitopes, offrant potentiellement une sensibilité améliorée dans les configurations ELISA sandwich lorsqu'il est associé à un anticorps de capture approprié.
• Incluez toujours des témoins d'espèces pertinentes (humain, souris, rat) et de tissus (foie, intestin grêle, plasma) pour confirmer la spécificité expérimentale.

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