Anticorps monoclonal APC/Cyanine7 Rat anti-souris CD45R/B220 pour FC - P06800

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD45R/B220 (CD45)

• CD45, désignée comme phosphatase C tyrosine-protéine de type récepteur, est une glycoprotéine transmembranaire également connue sous le nom d'antigène commun des leucocytes (L-CA), Ly-5 ou T200. Elle constitue un régulateur essentiel de l'activation et de la différenciation des lymphocytes.
• En tant que phosphatase tyrosine-protéine, CD45 est indispensable à l'activation des lymphocytes T via le récepteur antigénique. Elle régule positivement la coactivation des lymphocytes T lors de sa liaison à DPP4, facilitant la transduction du signal.
• La région intracellulaire contient deux domaines de phosphatase en tandem. Le premier domaine (D1) possède une activité catalytique, tandis que le second domaine (D2) influence la spécificité de substrat de D1, ajustant finement la sortie du signal.
• Pendant l'activation des lymphocytes T, CD45 recrute et déphosphoryle des molécules de signalisation clés, notamment SKAP1 et FYN. Elle déphosphoryle également LYN, modulant ainsi l'activité kinase de LYN et les voies de signalisation en aval.
• À l'interface entre les cellules présentatrices d'antigène et les lymphocytes T, CD45 interagit avec CLEC10A sur les cellules dendritiques immatures. Cette interaction, impliquant CD45 portant l'antigène Tn sur les lymphocytes T effecteurs, module le seuil d'activation des lymphocytes T pour limiter l'autoréactivité.
• CD45 est localisée sur la membrane cellulaire, les radeaux lipidiques et les synapses immunologiques, ce qui la place au cœur de la signalisation immunitaire. L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes ; l'isoforme B220, reconnue par cet anticorps, est majoritairement exprimée sur les lymphocytes B et constitue un marqueur classique de la lignée lymphocytaire B.
• Mots-clés : épissage alternatif, membrane cellulaire, glycoprotéine, hydrolase, membrane, phosphoprotéine, phosphatase de protéine, synapse, transmembranaire, hélice transmembranaire.

Conseils expérimentaux et indications techniques

• Cet anticorps est fourni sous forme de conjugué APC/Cyanine7, optimisé pour la cytométrie en flux (FC). Vérifiez les compensations de fluorescence à l'aide de contrôles monocolorés et incluez un contrôle d'isotype approprié pour définir les seuils de tri.
• L'immunogène est constitué de protéine recombinante CD45R/B220 de souris. Pour un coloration optimale, titrez l'anticorps dans la matrice biologique concernée (par exemple, suspensions de cellules de rate ou de ganglion lymphatique de souris) pour déterminer la concentration qui donne un signal spécifique maximal avec un bruit de fond minimal.
• Prenez soin de concevoir attentivement votre panel multicolore pour éviter le recouvrement spectral ; APC/Cyanine7 est généralement excité par un laser de 635 nm et émet dans le canal rouge lointain, nécessitant une compensation avec les autres fluorophores présents dans cette gamme.
• Validez l'expression dans le système d'échantillon prévu, comme les tissus lymphoïdes de souris, où B220 est fortement exprimé sur les lymphocytes B. Pour des applications non standard, des expériences pilotes sont recommandées.

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