Anticorps monoclonal de lapin APC/Cyanine7 anti-IgD humain/singe pour la cytométrie en flux - P01880

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'IgD

• L'IgD est la région constante des chaînes lourdes delta, existant sous forme d'immunoglobulines liées à la membrane (mIgD) et sécrétées (sIgD). Elle sert de principal récepteur antigénique sur les lymphocytes B périphériques, généralement co-exprimée avec l'IgM. Références associées : PMID:20176268, PMID:22158414
• La liaison de l'antigène à la mIgD déclenche l'expansion clonale des lymphocytes B et leur différenciation en plasmocytes, un processus impliquant la phosphorylation de CD79A et CD79B par les kinases de la famille Src. Références associées : PMID:20176268, PMID:22158414
• La concentration d'IgD soluble dans le sérum est inférieure à celle des IgG, IgA et IgM mais supérieure à celle des IgE, et sa sécrétion est régulée à la baisse suite à l'engagement du récepteur des lymphocytes B.
• L'IgD est un puissant inducteur de cytokines pro-inflammatoires (TNF, IL1B, IL1RN) et d'autres cytokines (IL6, IL10, LIF) à partir des monocytes sanguins périphériques. Références associées : PMID:10702483, PMID:11282392, PMID:8774350
• Les domaines variables de l'IgD sont assemblés par recombination V(D)J et subissent une hypermutation somatique, permettant une maturation d'affinité pour les antigènes. Références associées : PMID:17576170, PMID:20176268
• Plusieurs isoformes de la chaîne lourde de l'IgD sont produites par épissage alternatif ; la protéine est N-glycosylée et présente des ponts disulfure intra-chaîne et inter-chaînes conservés.
• La localisation subcellulaire comprend la membrane plasmique (pour la mIgD) et la sécrétion (pour la sIgD) ; la forme transmembranaire contient une seule hélice transmembranaire.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 99–384 de l'IgD humain, ce qui inclut une partie substantielle de la région extracellulaire ; cette conception peut favoriser la reconnaissance de l'IgD natif de surface sur les lymphocytes B.
• Étant donné la réactivité vérifiée avec l'humain et le singe cynomolgus, envisagez de valider les performances dans des échantillons pertinents de sang périphérique ou de tissu lymphoïde de ces espèces.
• Le conjugué APC/Cyanine7 est compatible avec les lignes laser rouges standard (633–647 nm) ; assurez-vous d'utiliser les jeux de filtres appropriés et des contrôles de compensation dans les panels de cytométrie en flux multicolores.
• Lors d'une co-marquage avec l'IgM ou d'autres marqueurs de lymphocytes B, vérifiez que le protocole de fixation et de perméabilisation n'interfère pas avec l'épitope extracellulaire reconnu par ce clone.
• Comme pour tout réactif de cytométrie en flux, titrez l'anticorps pour déterminer la concentration optimale pour votre système expérimental spécifique.

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