Anticorps monoclonal de lapin anti-CD8a humain/singe APC/Cyanine7 pour cytométrie en flux - P01732

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CD8a

• La chaîne alpha de la glycoprotéine de surface des lymphocytes T CD8 (CD8A) est une glycoprotéine membranaire intégrale qui agit comme corécepteur des molécules du CMH de classe I. Elle interagit avec le récepteur des lymphocytes T (TCR) et le CMH I sur les cellules présentatrices d'antigènes, recrutant la kinase Src LCK afin de déclencher des voies de signalisation intracellulaires essentielles à l'activation des lymphocytes T et aux réponses cytotoxiques.
• CD8A peut exister sous forme d'hétérodimère lié par un pont disulfure avec CD8B ou d'homodimère. Les hétérodimères sont typiques des lymphocytes T dérivés du thymus, tandis que les homodimères sont exprimés sur les cellules NK, les lymphocytes T mémoire, les lymphocytes intraépithéliaux, les monocytes et les cellules dendritiques.
• Ce mécanisme de corécepteur permet aux lymphocytes T cytotoxiques (CTL) de reconnaître et d'éliminer les cellules infectées ou tumorales, jouant un rôle essentiel dans l'immunité adaptative contre les menaces externes et internes.
• Dans les cellules NK, les homodimères de CD8A favorisent la survie et facilitent la conjugaison avec plusieurs cellules cibles, ce qui renforce la lyse en série.
• CD8A est exprimé sur un sous-ensemble de cellules tueuses naturelles, de lymphocytes T mémoire et de cellules dendritiques plasmacytoïdes, ces dernières après une stimulation virale telle que celle provoquée par le virus de l'herpès simplex de type 1, soulignant son rôle dans la défense immunitaire précoce.
• La protéine subit des modifications post-traductionnelles, notamment la formation de ponts disulfure, la glycosylation et la palmitoylation, qui sont essentielles à sa localisation et à sa fonction membranaires. L'épissage alternatif produit des isoformes à la fois ancrées à la membrane et sécrétées.
• La localisation subcellulaire comprend la membrane cellulaire et la sécrétion extracellulaire ; un peptide signal dirige sa synthèse vers la voie sécrétoire.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour la cytométrie en flux, une dilution initiale typique de 1:50 à 1:200 est souvent efficace ; effectuez un titrage sur le type cellulaire concerné afin de déterminer la concentration optimale.
• Utilisez des contrôles de compensation appropriés et protégez l'anticorps conjugué d'une exposition prolongée à la lumière afin de préserver la stabilité du fluorophore.
• Colorez les cellules vivantes dans un tampon de coloration glacé, sans perméabilisation, car CD8a est un antigène de surface cellulaire.
• Incluez un contrôle isot ype ou une coloration avec un marqueur congénique pour un réglage précis des populations CD8+, en particulier lors de l'analyse des sous-populations de lymphocytes T ou des cellules NK.
• Cet anticorps a été validé pour reconnaître le CD8a humain et celui du singe cynomolgus. Les utilisateurs travaillant sur plusieurs espèces doivent confirmer la réactivité dans leur système expérimental spécifique.

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