Anticorps monoclonal Lapin anti-Humain CD56/NCAM1 conjugué APC/Cyanine7 pour cytométrie en flux - P13591

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NCAM1

• La molécule d'adhésion des cellules neurales 1 (NCAM1) est une protéine d'adhésion cellulaire de la superfamille des immunoglobulines, caractérisée par des domaines de type immunoglobuline et des répétitions de type III de la fibronectine.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes, notamment des variantes ancrées par GPI et transmembranaires, ainsi que certaines formes sécrétées.
• NCAM1 médie l'adhésion cellulaire homophile et hétérophile, essentielle pour l'adhésion neurone-neurone, la fasciculation des neurites et la croissance des neurites.
• Elle sert également de récepteur cellulaire hôte pour le virus de la rage et le virus Zika, facilitant l'entrée virale.
• La protéine est principalement située à la membrane cellulaire, mais des isoformes sécrétées existent.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la N-glycosylation, la phosphorylation, la formation de ponts disulfures et l'ajout d'une ancre GPI, qui influencent sa structure et sa fonction.
• La masse moléculaire théorique du précurseur non traité est d'environ 94,6 kDa, mais la glycosylation augmente le poids apparent à environ 95 kDa et plus.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène était une protéine recombinante englobant les acides aminés 20-413, représentant le domaine extracellulaire du NCAM1 humain. Cette conception favorise la reconnaissance du CD56 exprimé en surface en cytométrie en flux.
• Pour la cytométrie en flux, utilisez directement le conjugué APC/Cyanine7 ; envisagez de titrer l'anticorps pour déterminer la concentration de travail optimale pour votre type cellulaire.
• Validez l'anticorps dans des systèmes d'échantillons pertinents : le CD56 est exprimé dans les cellules NK humaines et des sous-ensembles de neurones, ainsi des témoins positifs appropriés incluent des lignées cellulaires NK humaines ou des cellules mononucléées du sang périphérique.
• Assurez-vous que votre cytomètre en flux est équipé d'un laser et d'un ensemble de filtres appropriés pour la détection APC-Cy7 (excitation ~633-650 nm, émission ~780 nm).
• Comme l'anticorps est spécifique au CD56 humain, confirmez la réactivité croisée avec votre espèce cible si vous travaillez avec des échantillons non humains ; la réactivité croisée est rapportée uniquement pour l'humain.
• Pour des performances optimales, suivez les protocoles standard de coloration de surface et incluez des témoins d'isotype appropriés.

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