Anticorps monoclonal APC Rat anti-souris F4/80 pour cytométrie en flux - Q61549

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du récepteur E1 couplé à la protéine G d'adhésion (F4/80)

• Le récepteur E1 couplé à la protéine G d'adhésion (gène Adgre1), également appelé EMR1 ou F4/80, est une glycoprotéine transmembranaire à simple passage appartenant à la famille des récepteurs couplés à la protéine G d'adhésion, caractérisée par la présence de domaines de type EGF.
• Il fonctionne comme un récepteur orphelin impliqué dans l'adhésion cellulaire et les interactions entre cellules immunitaires, et un rôle dans le développement des lymphocytes T régulateurs (Treg) a été suggéré.
• Le récepteur est principalement exprimé à la surface des macrophages matures ; il est cependant absent des macrophages localisés dans les zones T des ganglions lymphatiques et de la rate, et on le trouve à de faibles niveaux sur les monocytes sanguins.
• Au niveau sous-cellulaire, F4/80 se localise sur la membrane cellulaire, ce qui est cohérent avec ses rôles dans l'adhésion et la communication intercellulaire.
• La région extracellulaire contient de nombreuses répétitions de type EGF et des domaines de type mucine, qui sont fortement glycosylés, contribuant à sa stabilité structurelle et à son potentiel de liaison à un ligand.
• L'analyse de la séquence indique la présence de ponts disulfures dans les domaines EGF et d'un domaine conservé induisant l'autoprotéolyse des GPCR, bien qu'aucune signalisation activée par une protéase n'ait été rapportée.
• En raison de son expression restreinte sur les macrophages, F4/80 constitue un marqueur précieux pour identifier et caractériser les populations de macrophages dans le système immunitaire de la souris.
• Le récepteur est classé sous des mots-clés liés au système immunitaire tels que immunité adaptative, glycoprotéine et récepteur couplé à la protéine G, ce qui souligne son rôle spécialisé dans la biologie des cellules immunitaires.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est une protéine recombinante représentant le F4/80 de souris ; les utilisateurs peuvent envisager de vérifier la spécificité en comparant la réactivité avec des modèles cellulaires déficients en F4/80 ou des tissus de souris knock-out.
• Cet anticorps conjugué à l'APC est validé pour la cytométrie en flux ; pour un coloration optimale, titrez l'anticorps en utilisant la population cellulaire concernée et incluez des contrôles d'isotype appropriés.
• Dans les panels de cytométrie en flux multicolore, assurez-vous d'effectuer une compensation minutieuse, notamment lors de la combinaison avec d'autres fluorophores ou détecteurs compatibles avec l'APC.
• Compte tenu du profil d'expression de F4/80 sur les macrophages, les contrôles positifs typiques incluent les macrophages péritonéaux induits par le thioglycollate ou les macrophages dérivés de la moelle osseuse ; les monocytes sanguins de souris primaires expriment de faibles niveaux et peuvent servir de contrôle à fluorescence faible.
• Pour les protocoles de fixation et de perméabilisation, vérifiez si l'antigénicité est préservée ; les cellules fraîchement isolées sont préférées pour maintenir l'intégrité des marqueurs de surface.

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