Anticorps monoclonal APC lapin anti-souris IL-17A pour cytométrie en flux (intracellulaire) - Q62386

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'IL-17A

• L'interleukine-17A (IL-17A), également connue sous le nom de CTLA-8, est une cytokine proinflammatoire appartenant à la famille de l'IL-17 et un effecteur caractéristique des cellules T auxiliaires 17 (Th17), jouant un rôle central dans la défense antimicrobienne de l'hôte et l'intégrité tissulaire. Références associées : PMID:18025225 PMID:19144317 PMID:26431948
• Transmet son signal via le récepteur hétérodimère IL17RA-IL17RC, qui recrute TRAF3IP2 et active les voies NF-κB dépendantes de TRAF6 et MAP kinase pour induire la transcription de cytokines, chimiokines, peptides antimicrobiens et métalloprotéinases matricielles, orchestrant ainsi de fortes réponses inflammatoires. Références associées : PMID:16200068 PMID:17911633 PMID:19144317
• Induit principalement l'activation et le recrutement des neutrophiles sur les sites d'infection et d'inflammation ; dans l'épithélium des voies aériennes, il médie la chimiotaxie des neutrophiles via l'induction des chimiokines CXCL1 et CXCL5. Références associées : PMID:18025225 PMID:27923703
• Dans les organes lymphoïdes secondaires, l'IL-17A contribue à la formation du centre germinatif en modulant la chimiotaxie des cellules B vers CXCL12 et CXCL13, améliorant la rétention des cellules B, l'hypermutation somatique et la différenciation des plasmocytes. Références associées : PMID:18157131
• Agit comme cytokine effectrice des cellules T gamma‑delta, des cellules iNKT et des cellules lymphoïdes innées de groupe 3, favorisant l'inflammation neutrophilique précoce et l'élimination rapide des bactéries. Références associées : PMID:17372004 PMID:20364087 PMID:28709803
• Joue un rôle direct dans l'intégrité de la barrière épithéliale en régulant la localisation de l'occludine (OCLN) et la biogenèse des jonctions serrées après une lésion aiguë ; agit en synergie avec l'IL‑17F pour induire la production de β-défensines antimicrobiennes (DEFB1, DEFB103A, DEFB104A) par les cellules épithéliales muqueuses. Références associées : PMID:26431948 PMID:19144317
• Contribue à la défense antivirale de l'hôte : améliore la cytotoxicité des cellules T contre le virus du Nil occidental, augmente les réponses des cellules B lors de l'infection par le virus de la grippe A (H5N1) et stimule la différenciation des cellules B‑1a pour la production d'IgM spécifiques du virus lors de l'élimination du H1N1. Références associées : PMID:21946434 PMID:26735852 PMID:27795421
• Glycoprotéine sécrétée d'un poids moléculaire d'environ 17,5 kDa (précurseur), contenant un peptide signal et une liaison disulfure ; principalement exprimée par les cellules Th17 et, dans une moindre mesure, par les cellules lymphoïdes innées, les sous-populations de cellules T γδ et les cellules iNKT.

Conseils expérimentaux et techniques

• Pour la cytométrie en flux intracellulaire, stimulez les cellules T de souris ou les populations cellulaires concernées avec de la PMA/ionomycine en présence d'un inhibiteur du transport protéique (par exemple, la brefeldine A) pendant 4 à 6 heures avant la coloration pour améliorer la détection de l'IL‑17A.
• Après la coloration de surface, fixez et perméabilisez les cellules à l'aide d'un kit de fixation/perméabilisation approprié, et incluez un contrôle isotypique adapté et un colorant de viabilité pour évaluer la liaison non spécifique et distinguer les cellules vivantes des cellules mortes.
• Réalisez un titrage de l'anticorps pour déterminer la dilution optimale adaptée à votre type de cellule et vos conditions d'activation ; la variabilité entre clones peut influencer l'affinité de liaison.
• Validez la spécificité sur des échantillons de souris knock-out pour l'IL‑17A ou en utilisant un peptide de blocage/antigène contrôle lorsque cela est possible.
• Notez que l'anticorps a été obtenu contre les acides aminés 26 à 158, qui correspondent à la forme mature sécrétée mais n'incluent pas le peptide signal ; confirmez la réactivité dans le contexte biologique étudié.

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