Anticorps monoclonal de lapin anti-CD4 de souris conjugué à l’APC pour cytométrie en flux - P06332

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CD4

• CD4 (glycoprotéine de surface des lymphocytes T CD4), également connue sous les noms L3T4 ou Ly-4, est une glycoprotéine transmembranaire de type I appartenant à la superfamille des immunoglobulines.
• Dans les lymphocytes T auxiliaires, CD4 agit comme corécepteur des molécules du CMH de classe II. Il se lie aux régions invariantes du CMH-II tandis que le récepteur des lymphocytes T (TCR) reconnaît l’antigène peptidique, ce qui augmente la sensibilité et l’activation des lymphocytes T.
• Lors de sa coréception avec le CMH-II, CD4 recrute la kinase de la famille Src LCK au complexe TCR-CD3, déclenchant la phosphorylation des motifs d’activation à base de tyrosine des récepteurs immunitaires (ITAM) et des cascades de signalisation en aval qui favorisent la production de lymphokines, la motilité et l’adhésion des lymphocytes T.
• CD4 est essentielle à la sélection positive des lymphocytes T auxiliaires dans le thymus et contribue également à la différenciation des monocytes en macrophages matures.
• Au-delà des lymphocytes T, CD4 est exprimée sur d’autres cellules immunitaires, notamment les macrophages, les cellules dendritiques et les cellules NK, où elle module la différenciation, l’activation, l’expression des cytokines et la migration cellulaire par des mécanismes indépendants du TCR/LCK.
• La protéine contient un peptide signal N-terminal, quatre domaines extracellulaires de type immunoglobuline (D1–D4), une hélice transmembranaire et une courte queue cytoplasmique comportant des sites de palmitoylation ; elle est N-glycosylée et stabilisée par des ponts disulfure.
• L’épissage alternatif génère plusieurs isoformes, l’isoforme canonique ayant une masse moléculaire calculée d’environ 51 kDa.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond au domaine extracellulaire (acides aminés 27–394) de CD4 de souris, ce qui rend cet anticorps conjugué à l’APC adapté au marquage de surface et à l’analyse par cytométrie en flux de cellules vivantes.
• Pour la cytométrie en flux, titrez l’anticorps afin de déterminer une concentration optimale en utilisant la population cellulaire concernée (par exemple, des splénocytes ou des thymocytes de souris) et incluez des contrôles isotopiques appropriés ainsi que des colorants de viabilité.
• Cet anticorps est spécifique de CD4 de souris ; sa réactivité avec d’autres espèces n’a pas été déterminée. Vérifiez la réactivité croisée si nécessaire.
• Le conjugué APC est compatible avec les instruments standard de cytométrie en flux équipés d’un laser rouge (633 nm) ; évitez toute exposition excessive à la lumière afin de prévenir le photoblanchiment.

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