Anticorps monoclonal APC lapin anti-souris CD366 (TIM-3) pour cytométrie en flux - Q8VIM0

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD366 (TIM-3)

• Homologue 2 du récepteur cellulaire du virus de l'hépatite A (HAVCR2), également appelé protéine 3 à domaine immunoglobuline et mucine des lymphocytes T (TIM-3) ou protéine membranaire 3 des lymphocytes T, est une glycoprotéine transmembranaire de type I appartenant à la superfamille des immunoglobulines. L'épissage alternatif produit des isoformes, et la séquence canonique de souris a un poids moléculaire calculé d'environ 31 kDa (22 kDa observé du fait de la glycosylation).
• Il agit comme un récepteur immunomodulateur avec des rôles généralement inhibiteurs, supprimant les réponses auto- et alloimmunitaires médiées par les lymphocytes T helper de type 1 (Th1) et favorisant la tolérance immunologique (PubMed:14556006, PubMed:18006747). Dans les lymphocytes T CD8+, il atténue la signalisation du TCR en bloquant les activités des promoteurs NF-kappaB et NFAT, réduisant la sécrétion d'IL-2 (par similarité). Références associées : PMID:14556006 PMID:18006747
• Cependant, des fonctions activatrices dépendantes du contexte ont été rapportées, notamment l'amélioration de la signalisation du TCR dans les lymphocytes T via ZAP70, LCP2, LCK et FYN (PubMed:21807895) et l'augmentation des réponses des lymphocytes T CD8+ lors d'une infection aiguë (PubMed:24567532). Sur les cellules tueuses naturelles (NK), il agit comme corécepteur pour augmenter la production d'IFN-gamma, mais peut également supprimer la cytotoxicité selon les conditions (PubMed:25337993). Références associées : PMID:21807895 PMID:24567532 PMID:25337993
• TIM-3 est un récepteur pour LGALS9 (galectine-9). Cette interaction entraîne la suppression des réponses lymphocytaires T et l'apoptose via la phosphorylation de HAVCR2 et sa dissociation de BAG6 (PubMed:22863785). Il contribue également à l'immunité innée en stimulant la sécrétion d'IL-1β par les macrophages et en limitant la croissance bactérienne intracellulaire après liaison à LGALS9 sur les macrophages infectés par Mycobacterium tuberculosis (PubMed:20937702). Références associées : PMID:22863785 PMID:20937702
• De plus, TIM-3 se lie à la phosphatidylsérine (PtSer) de manière dépendante du calcium, médiant la phagocytose des cellules apoptotiques par les cellules dendritiques (PubMed:20083673, PubMed:19224762). Dans les cellules dendritiques infiltrant les tumeurs, il supprime les réponses immunitaires innées médiées par les acides nucléiques en interagissant avec HMGB1 (PubMed:22842346). Références associées : PMID:20083673 PMID:19224762 PMID:22842346
• La localisation subcellulaire inclut la membrane plasmique, les jonctions cellulaires et une forme sécrétée. Les modifications post-traductionnelles comprennent les ponts disulfure, la glycosylation et la phosphorylation, qui régulent sa fonction et ses interactions de signalisation.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond au domaine extracellulaire (acides aminés 20-191), ce qui garantit la reconnaissance du récepteur natif à la surface cellulaire, adapté à la cytométrie en flux.
• Il est recommandé de titrer l'anticorps pour déterminer la concentration de coloration optimale pour votre type cellulaire spécifique, car les niveaux d'expression de TIM-3 varient selon l'état d'activation.
• TIM-3 étant exprimé sur les lymphocytes T activés, les macrophages, les cellules dendritiques, les cellules NK et les mastocytes, validez l'anticorps dans le système d'échantillon approprié et incluez des contrôles d'isotype adaptés.
• Pour la cytométrie en flux, utilisez un colorant de viabilité pour exclure les cellules mortes, car TIM-3 peut se lier à la phosphatidylsérine des cellules apoptotiques, ce qui peut entraîner une coloration non spécifique.

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