Anticorps monoclonal anti-Ki67 Humain/Singe APC de Lapin pour la Cytométrie en Flux Intracellulaire - P46013

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Ki67

• Ki-67 agit comme un répulsif chromosomique pendant la mitose précoce, empêchant l'effondrement des chromosomes en formant une barrière stérique et électrostatique à la surface du chromosome. Références associées : PMID:27362226
• Pendant l'anaphase mitotique, Ki-67 devient un attracteur chromosomique, favorisant le regroupement des chromosomes et excluant les particules cytoplasmiques de l'espace nucléaire futur. Références associées : PMID:32879492 PMID:39153474
• La déphosphorylation pendant la sortie de la mitose et l'exposition d'un patch basique conservé induisent une séparation de phases liquide-liquide dépendante de l'ARN, fusionnant les surfaces chromosomiques. Références associées : PMID:39153474 PMID:28935370
• Ki-67 se lie à l'ADN, avec une préférence pour l'ADN superenroulé et riche en AT. Références associées : PMID:10878551
• La localisation subcellulaire comprend les surfaces chromosomiques, les nucléoles et le noyau, ce qui est cohérent avec son rôle dynamique pendant le cycle cellulaire.
• La protéine subit de multiples modifications post-traductionnelles, notamment phosphorylation, acétylation et ubiquitination, qui régulent probablement son activité et sa localisation.
• Ki-67 peut influencer l'organisation de la chromatine de haut niveau, bien que son rôle direct reste à l'étude. Références associées : PMID:24867636
• L'épissage alternatif génère de multiples isoformes de Ki-67, modulant potentiellement sa fonction dans différents contextes cellulaires.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 2271–2370 près de l'extrémité C-terminale ; l'anticorps peut reconnaître à la fois l'isoforme pleine longueur et les isoformes épissées pertinentes contenant cet épitope.
• Pour la cytométrie en flux intracellulaire, optimisez les étapes de fixation et de perméabilisation pour assurer l'accessibilité de l'antigène nucléaire Ki-67.
• Utilisez un contrôle isotype approprié et validez dans une lignée cellulaire proliférante (par exemple, HeLa) avec un contrôle négatif de cellules au repos pour confirmer la spécificité.
• En raison de la grande taille de la protéine (359 kDa), envisagez d'acquérir un nombre d'événements suffisant et d'utiliser des paramètres de compensation de fluorescence appropriés.

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