Anticorps monoclonal APC de lapin anti-IgM humain/singe pour cytométrie en flux - P01871

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la chaîne mu constante de l'immunoglobuline lourde

• Le gène IGHM code pour la région constante de la chaîne lourde mu, qui définit l'isotype de l'anticorps IgM. L'IgM est le premier anticorps produit au cours de l'immunité humorale, agissant à la fois comme récepteur des lymphocytes B (RLB) lié à la membrane et comme molécule effectrice sécrétée. Références associées : PMID:20176268 PMID:22158414 PMID:17576170
• L'IgM sécrétée (sIgM) se multimérise principalement en pentamères via la région Fc, offrant une liaison antigénique de haute avidité et permettant la reconnaissance de structures conservées dérivées du soi et de pathogènes. Références associées : PMID:32029689 PMID:37095205
• La sIgM exerce ses fonctions effectrices en activant la voie classique du complément par liaison à C1q et en engageant les récepteurs Fc, ce qui favorise la phagocytose des cellules apoptotiques et l'induction de réponses IgG neutralisantes. Références associées : PMID:12847249 PMID:19006321 PMID:28230186
• L'IgM lié à la membrane forme le complexe RLB, fournissant une signalisation tonique constitutive essentielle à la survie des lymphocytes B et médiant la signalisation pré-RLB qui régule la sélection des lymphocytes B et l'exclusion allélique.
• L'IgM joue un rôle essentiel dans l'immunité muqueuse en subissant une transcytose à travers l'épithélium muqueux via PIGR. Les complexes IgM-antigène sont rétrotranscytosés par FCMR à travers les cellules M pour la présentation de l'antigène. Références associées : PMID:32029689
• La localisation subcellulaire se situe principalement au niveau de la membrane cellulaire (en tant que RLB) ou est secrétée (en tant qu'anticorps soluble). Les modifications post-traductionnelles comprennent la N-glycosylation et la formation de ponts disulfures intra- et interchaînes.
• L'épissage alternatif génère des isoformes liées à la membrane et secrétées, permettant au même gène de chaîne lourde de produire à la fois des formes réceptrices et des formes anticorps.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre la région constante de l'IgM (aa 218‑453), donc l'anticorps est censé reconnaître l'ensemble de l'IgM humain indépendamment de la spécificité antigénique. Confirmez la détection de l'IgM soluble et liée à la membrane dans votre système.
• Cet anticorps conjugué à l'APC est adapté à la cytométrie en flux directe sans étape de détection secondaire. Incluez des contrôles d'isotype appropriés et des réactifs de blocage Fc pour minimiser le bruit de fond.
• La réactivité croisée avec l'IgM du singe cynomolgus est indiquée ; vérifiez les performances si vous utilisez d'autres espèces de primates.
• Étant donné que le poids protéique de la chaîne lourde de l'IgM sécrétée est d'environ 49 kDa, envisagez un tri par taille ou une confirmation par western blot dans des conditions réductrices si la validation du test l'exige.
• Pour la coloration de l'IgM intracellulaire, optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation pour votre type de cellule spécifique.

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