Anticorps monoclonal de lapin anti-CD4 Humain/Singe conjugué à l'APC pour la cytométrie en flux - P01730

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD4

• Le CD4 (glycoprotéine de surface des lymphocytes T, alias T4/Leu-3) est un membre de la superfamille des immunoglobulines, présentant quatre domaines extracellulaires de type Ig, une seule hélice transmembranaire et une queue cytoplasmique qui interagit avec des molécules de signalisation intracellulaires.
• Fonctionne comme un corécepteur pour les molécules du CMH de classe II sur les cellules présentatrices d'antigène : lors de la reconnaissance de l'antigène, le CD4 se lie au CMH de classe II et s'associe simultanément au récepteur des cellules T (TCR), recrutant la kinase Src LCK pour phosphoryler les chaînes CD3 et initier l'activation des lymphocytes T, la production de lymphokines et l'adhésion cellulaire.
• Essentiel pour le développement des lymphocytes T auxiliaires dans le thymus et pour le maintien de leur fonction en périphérie ; déclenche également la différenciation des monocytes en macrophages matures.
• Fortement exprimé à la surface des lymphocytes T auxiliaires et, dans une moindre mesure, sur d'autres cellules immunitaires incluant les macrophages, les cellules dendritiques et les cellules NK, où il module la différenciation, l'expression des cytokines et la migration.
• Localisé principalement à la membrane plasmique en tant que protéine membranaire de type I à passage unique ; son internalisation peut être déclenchée par la liaison d'un ligand ou une interaction virale.
• Les modifications post-traductionnelles clés incluent la phosphorylation de la queue cytoplasmique, la palmitoylation sur une cystéine proche de la membrane, et la glycosylation N-liée des domaines extracellulaires, critiques pour la localisation membranaire et les interactions protéiques.
• Agit comme récepteur pour plusieurs virus : c'est le récepteur principal du VIH-1, se liant à la glycoprotéine d'enveloppe virale gp120 pour médier l'entrée virale ; il est régulé à la baisse par la protéine Vpu du VIH-1 ; et sert également de récepteur pour l'Herpèsvirus humain 7 (HHV-7). Références associées : PMID:12089508 PMID:16331979 PMID:2214026 PMID:17346169 PMID:7909607

Guide expérimental et conseils techniques

• Cet anticorps est conjugué à l'Allophycocyanine (APC) et fourni dans un format prêt à l'emploi pour la cytométrie en flux (FC). L'immunogène était la protéine recombinante du CD4 humain, et l'anticorps a été généré chez le lapin en tant que source monoclonale.
• Pour la cytométrie en flux, titrer l'anticorps pour déterminer la concentration optimale pour votre type cellulaire spécifique et vos conditions expérimentales. Utiliser un contrôle isotype conjugué approprié pour évaluer la liaison non spécifique.
• Il a été validé que cet anticorps présente une réactivité croisée avec le CD4 humain et du singe cynomolgus. Pour d'autres espèces, une validation indépendante est recommandée.
• Préparer des suspensions de cellules uniques en utilisant des protocoles standards et inclure un colorant de viabilité pour exclure les cellules mortes afin d'obtenir un immunophénotypage précis.
• Pour une coloration intracellulaire ou des protocoles combinés surface/intracellulaire, optimiser les étapes de fixation et de perméabilisation si nécessaire.

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