Anticorps monoclonal APC lapin anti-humain/singe CD14 pour cytométrie en flux - P08571

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD14

• Le CD14 est un antigène de différenciation des monocytes, également appelé antigène My23. C'est une glycoprotéine riche en leucine spécifique des cellules myéloïdes, ancrée à la membrane par un ancrage GPI. Il appartient à la famille des répétitions riches en leucine (LRR) et est fortement N-glycosylé.
• Il agit comme corécepteur pour le lipopolysaccharide bactérien (LPS), s'associe au LBP pour transporter le LPS vers le complexe TLR4/MD-2, conduisant à l'activation de NF-kB dépendante de MyD88/TIRAP/TRAF6 et à la sécrétion de cytokines inflammatoires. Références associées : PMID:1698311, PMID:23264655, PMID:20133493, PMID:22265692, PMID:8612135
• Il agit comme corécepteur pour l'hétérodimère TLR2:TLR6 en réponse aux lipopeptides diacylés et pour l'hétérodimère TLR2:TLR1 en réponse aux lipopeptides triacylés, déclenchant la signalisation depuis la surface cellulaire puis un ciblage vers l'appareil de Golgi par une voie dépendante des radeaux lipidiques. Références associées : PMID:16880211
• Il se lie au LDL électronégatif (LDL(-)) et médie la libération de cytokines induite par le LDL(-). Références associées : PMID:23880187
• Il se localise sur la membrane cellulaire, dans les radeaux membranaires, l'appareil de Golgi, et peut être sécrété dans le milieu extracellulaire.
• Il est fortement exprimé à la surface des monocytes et faiblement sur les granulocytes ; il est détecté sur les macrophages au niveau protéique et également exprimé par la plupart des macrophages tissulaires. Références associées : PMID:1698311

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps conjugué à l'APC est adapté à la cytométrie en flux ; prévoyez d'utiliser des contrôles d'isotype appropriés et de titrer l'anticorps pour obtenir un rapport signal/bruit optimal.
• Le CD14 est fortement exprimé sur les monocytes et les macrophages ; ajoutez un marqueur de lignée monocyte/macrophage pour le tri (gating) si vous analysez des populations mélangées.
• Les conjugués APC sont brillants et photostables ; concevez soigneusement vos panneaux multicolores pour minimiser les problèmes de compensation avec les autres fluorophores.
• Validez la coloration dans vos conditions expérimentales spécifiques ; la fixation et la perméabilisation peuvent affecter l'épitope et nécessitent une optimisation du protocole.

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