Anticorps monoclonal APC lapin anti-humain CD172a/SIRPα pour cytométrie en flux - P78324

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SIRPα/CD172a

• La protéine substrat 1 de la tyrosine-protéine phosphatase non récepteur (SIRPα, également connue sous les noms SHPS-1, CD172a, BIT, MYD-1, p84) est un récepteur de surface cellulaire de type immunoglobuline qui agit comme protéine d'ancrage pour PTPN6 et PTPN11, induisant leur translocation du cytosol vers la membrane plasmique.
• Fonctionne comme récepteur pour CD47, médiant la régulation négative de la phagocytose, de l'activation des mastocytes et de l'activation des cellules dendritiques, et inhibant la maturation et la production de cytokines par les cellules dendritiques après liaison à CD47.
• Favorise l'adhésion des neurones cérébelleux, la croissance des neurites et l'attachment des cellules gliales, suggérant des rôles dans la synaptogenèse et la fonction synaptique.
• Agit comme récepteur pour la thrombospondine-1 (THBS1), qui stimule la phosphorylation de SIRPA et déclenche la production d'ROS dérivés de la NADPH oxydase dans les cellules non phagocytiques. Références associées : PMID:24511121
• Existe sous trois isoformes principales (Sirp-alpha-1, -2, -3) dues à l'épissage alternatif, avec une expression tissulaire ubiquitaire mais des niveaux les plus élevés dans le cerveau et sur les cellules myéloïdes, et une absence sur les lymphocytes T.
• Se localise sur la membrane cellulaire en tant que protéine membranaire de type I à passage unique, avec une région extracellulaire contenant trois domaines de type immunoglobuline et une queue cytoplasmique avec des sites de phosphorylation sur tyrosine.
• Fortement glycosylée et phosphorylée, elle joue un rôle dans l'immunité antivirale en limitant l'internalisation des arénavirus du Nouveau Monde.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 31 à 370, qui comprend l'ensemble du domaine extracellulaire ; par conséquent, l'anticorps est supposé reconnaître la conformation native de SIRPα à la surface cellulaire.
• En tant qu'anticorps monoclonal conjugué à l'APC, il est prêt pour une immunofluorescence directe en cytométrie en flux sans nécessiter de réactif de détection secondaire.
• Pour un coloration optimale, titrez l'anticorps sur le type de cellule cible (par exemple, monocytes humains, macrophages ou lignées de cellules dendritiques) pour déterminer la concentration de travail.
• Incluez un contrôle d'isotype approprié (clone d'IgG de lapin conjugué à l'APC apparié) et, si vous utilisez du sang total ou des suspensions cellulaires issues de tissus, pré-incubez avec un réactif de blocage des récepteurs Fc pour minimiser la liaison non spécifique.
• Puisque SIRPα n'est pas exprimé sur les lymphocytes T, ceux-ci peuvent servir de contrôle négatif interne ; validez la spécificité dans vos conditions expérimentales en utilisant des populations cellulaires positives et négatives connues.

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