Anticorps monoclonal APC lapin anti-humain CD162/PSGL-1 pour cytométrie en flux - Q14242

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du ligand glycoprotéique de la P-sélectine 1 (CD162/PSGL-1)

• Le CD162/PSGL-1 est un protéoglycane de type SLe(x) qui constitue le ligand principal des P-, E- et L-sélectines, médiant le roulement rapide des leucocytes sur l'endothélium vasculaire lors de l'inflammation.
• La protéine existe sous plusieurs isoformes dues à l'épissage alternatif, ce qui peut moduler ses propriétés de liaison ou son expression.
• Il est majoritairement exprimé à la surface des neutrophiles, des monocytes et de la plupart des lymphocytes, jouant un rôle essentiel dans le trafic des leucocytes.
• La localisation subcellulaire est principalement au niveau de la membrane plasmique (Membrane ; protéine membranaire de type I à passage unique).
• Le PSGL-1 est fortement modifié post-traductionnellement, notamment par sulfation, sialylation et O-glycosylation, qui sont essentiels à la liaison aux sélectines ; d'autres modifications incluent la phosphorylation, la formation de ponts disulfures et la formation de pyroglutamate N-terminal.
• En plus de son rôle dans l'adhésion cellulaire, le PSGL-1 agit comme récepteur pour l'entérovirus 71, facilitant l'entrée du virus dans les cellules hôtes.
• La protéine contient un peptide signal, un domaine extracellulaire de type mucine avec des répétitions décamériques, une hélice transmembranaire et une queue cytoplasmique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspondant au domaine extracellulaire (aa 42-295), l'anticorps obtenu est censé reconnaître la forme transmembranaire native du CD162/PSGL-1 sur les cellules vivantes, ce qui le rend particulièrement adapté à la cytométrie en flux (CF).
• Pour les applications en CF, optimisez la titration de l'anticorps et envisagez l'utilisation de contrôles d'isotype appropriés pour garantir la spécificité, notamment compte tenu du potentiel de liaison aux récepteurs Fc sur les leucocytes.
• Validez l'expression du CD162 dans les populations cellulaires cibles (par exemple les leucocytes sanguins périphériques, les lymphocytes T activés ou les lignées cellulaires appropriées) avant utilisation, car les niveaux d'expression peuvent varier selon l'état d'activation cellulaire.
• Le PSGL-1 étant une protéine fortement glycosylée, l'épitope reconnu peut être dépendant de la conformation ; des conditions dénaturantes peuvent affecter la liaison de l'anticorps dans d'autres applications comme le western blot.
• Le conjugué APC permet une détection fluorescente directe, éliminant le besoin de réactifs secondaires ; assurez une compensation correcte dans les panneaux de cytométrie en flux multicolore pour éviter le recouvrement spectral.

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