Anticorps monoclonal anti-Humain CD117/c-Kit conjugué APC de lapin pour FC - P10721

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD117/c-Kit

• CD117/c-Kit, également connu sous le nom de récepteur du facteur de croissance des mastocytes/cellules souches Kit, est une tyrosine kinase réceptrice transmembranaire codée par le proto-oncogène KIT. Elle appartient à la famille des tyrosine kinases réceptrices de type III et se caractérise par des domaines extracellulaires de type immunoglobuline, une hélice transmembranaire unique et un domaine kinase intracellulaire divisé.
• La fonction principale de CD117/c-Kit est de servir de récepteur à la surface cellulaire pour le facteur des cellules souches (SCF/KITLG). Suite à la liaison du ligand, KIT se dimérise, entraînant une autophosphorylation et l'activation de multiples cascades de signalisation en aval, notamment les voies PI3K/AKT, RAS/MAPK et JAK/STAT.
• Par ces voies, CD117/c-Kit régule des processus cellulaires essentiels tels que la survie, la prolifération, la différenciation et la migration cellulaires. Il joue un rôle crucial dans l'hématopoïèse, le maintien des cellules souches, la gamétogenèse, la mélanogenèse, ainsi que le développement et la fonction des mastocytes.
• CD117/c-Kit est principalement localisé à la membrane cellulaire, mais après activation, il peut être internalisé et se trouver transitoirement dans le cytoplasme avant dégradation ou recyclage.
• La protéine subit plusieurs modifications post-traductionnelles, notamment une glycosylation N-liée, la formation de ponts disulfure et une ubiquitination. La phosphorylation induite par le ligand sur plusieurs résidus tyrosine crée des sites d'ancrage pour les protéines de signalisation contenant un domaine SH2, propageant ainsi le signal.
• Dans le testicule humain, CD117/c-Kit est exprimé dans les spermatogonies et les cellules de Leydig interstitielles, mais pas dans les cellules de Sertoli ou les spermatocytes. Son expression persiste dans les spermatozoïdes éjaculés. Références associées : PMID:20601678

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène utilisé pour générer cet anticorps comprend les acides aminés 26-520 du CD117/c-Kit humain, ce qui correspond au domaine extracellulaire. Cette conception peut conférer une spécificité pour le récepteur natif à la surface cellulaire.
• Cet anticorps est conjugué à l'APC (allophycocyanine) pour des applications directes en cytométrie en flux. Pensez à utiliser des contrôles de compensation appropriés lors de la réalisation d'une cytométrie en flux multicolore et évitez une exposition prolongée à la lumière pour préserver la stabilité du fluorophore.
• Pour la cytométrie en flux, validez l'anticorps sur des lignées cellulaires humaines connues pour exprimer CD117 (par exemple, HEL, M-07e, ou des cellules de moelle osseuse primaires). Incluez un contrôle isotype approprié pour évaluer la liaison non spécifique.
• La concentration optimale de l'anticorps doit être déterminée par des expériences de titration dans le système expérimental pertinent. La fixation et la perméabilisation des cellules peuvent affecter la liaison de cet anticorps, évaluez donc la compatibilité si des cibles intracellulaires sont également marquées.

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