Anticorps monoclonal de souris anti-CD3 humain conjugué à l'APC pour la cytométrie en flux - P07766

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CD3 epsilon

• CD3E (chaîne epsilon du CD3, alias T3E, TCRE, IMD18) est une sous-unité du complexe TCR-CD3 exprimée sur les lymphocytes T, essentielle à l'immunité adaptative. Références associées : PMID:15294938 PMID:15546002 PMID:2470098

• Lors de l'engagement du TCR, CD3E, avec les autres chaînes du CD3, transduit les signaux d'activation à travers la membrane via ses motifs d'activation à base de tyrosine des récepteurs immunitaires (ITAM). Références associées : PMID:2470098 PMID:40592325

• La phosphorylation des ITAM par LCK et FYN crée des sites d'ancrage pour ZAP70, déclenchant des cascades de signalisation en aval, notamment les flux de calcium et les voies MAPK/ERK. Références associées : PMID:2470098 PMID:40592325

• CD3E est essentiel au développement des lymphocytes T ; il participe à la sélection et à la maturation des thymocytes.

• Il contient des motifs d'endocytose qui assurent l'internalisation et la régulation négative à la surface du complexe TCR-CD3, modulant ainsi la durée du signal. Références associées : PMID:10384095 PMID:26507128

• CD3E sert également de récepteur à ITPRIPL1, qui inhibe l'activation des lymphocytes T en favorisant l'interaction avec NCK1 et en bloquant la liaison à ZAP70 ainsi que la signalisation NF-kB. Références associées : PMID:12110186 PMID:38614099

• Au niveau subcellulaire, CD3E est localisé à la membrane cellulaire, ce qui correspond à son rôle dans la reconnaissance des ligands extracellulaires et la transduction des signaux.

• Il se caractérise par un peptide signal, un domaine d'immunoglobuline, une hélice transmembranaire et des motifs ITAM cytoplasmiques ; il subit une phosphorylation et la formation de ponts disulfure.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour la cytométrie en flux, effectuez un titrage de l'anticorps afin de déterminer la concentration de coloration optimale pour votre population cellulaire ; généralement, 0,5–5 µg pour 1×10⁶ cellules constitue un point de départ.
• Incluez des contrôles d'isotype appropriés ainsi que des contrôles fluorescence moins un (FMO) afin de garantir la spécificité.
• Le conjugué APC est excitable par des lasers de 633–647 nm ; limitez l'exposition à la lumière afin de prévenir la photodécoloration.
• Étant dérivé d'une protéine recombinante, cet anticorps reconnaît la chaîne epsilon native du CD3 ; une fixation/perméabilisation peut être nécessaire pour les épitopes intracellulaires.
• Cet anticorps est validé pour les échantillons humains ; la réactivité croisée avec d'autres espèces n'a pas été déterminée. Effectuez donc des essais dans les systèmes modèles concernés si nécessaire.

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