Anticorps monoclonal anti-Siglec-7/CD328 (lapin) conjugué à l’APC pour la cytométrie en flux - Q9Y286

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de Siglec-7/CD328

• Siglec-7 (lectine 7 de type Ig se liant à l’acide sialique), également connu sous les noms CD328, AIRM-1, p75 ou D-siglec, est une protéine transmembranaire de type I appartenant à la superfamille des immunoglobulines et à la famille des siglecs, des lectines se liant à l’acide sialique.
• Agit comme un récepteur inhibiteur sur les cellules immunitaires, en se liant préférentiellement aux acides sialiques liés en α-2,3 et α-2,6 à la surface des cellules cibles ; la liaison au ligand déclenche la phosphorylation de ses motifs ITIM sur les tyrosines, recrutant des phosphatases contenant un domaine SH2 afin de bloquer les signaux activateurs.
• Joue un rôle clé dans la régulation de la cytotoxicité des cellules tueuses naturelles (NK), en inhibant la destruction des cellules cibles exprimant l’acide sialique ; supprime également la différenciation des précurseurs hématopoïétiques CD34+ vers la lignée myélomonocytaire et inhibe la prolifération des cellules myéloïdes leucémiques.
• Est principalement exprimé sur les cellules NK au repos et activées, et à des niveaux plus faibles sur les granulocytes et les monocytes ; une forte expression est observée dans le placenta, le foie, les poumons, la rate et les leucocytes du sang périphérique.
• Est localisé sur la membrane plasmique en tant que protéine transmembranaire à passage unique ; la région extracellulaire contient des domaines de type Ig C2 responsables de la reconnaissance de l’acide sialique, lesquels peuvent être masqués par des interactions cis à la surface de la même cellule.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation liée à l’azote, la formation de ponts disulfure et la phosphorylation, les sites de phosphotyrosine servant de sites d’ancrage aux protéines à domaine SH2.
• L’épissage alternatif génère plusieurs variants de transcrits, pouvant moduler les propriétés de liaison aux ligands ou les niveaux d’expression.
• Les études structurales (structure 3D disponible) révèlent les bases moléculaires de la spécificité pour l’acide sialique, contribuant à la compréhension de ses fonctions immunomodulatrices.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Cet anticorps conjugué à l’APC (clone non spécifié) a été produit contre le domaine extracellulaire (aa 18-144) du Siglec-7 humain, ce qui le rend adapté à la détection de l’expression à la surface cellulaire par cytométrie en flux.
• Pour la FC, effectuer une titration de l’anticorps afin de déterminer la concentration optimale ; utiliser un contrôle isotypique apparié pour définir les fenêtres d’analyse et évaluer le bruit de fond.
• Valider le marquage sur des lignées cellulaires connues pour être positives ou sur des cellules NK humaines primaires ; la réactivité croisée étant rapportée uniquement chez l’humain, veiller à ce que le système expérimental utilise des échantillons humains.
• Tenir compte du fait que le Siglec-7 peut subir des interactions cis masquant les épitopes ; un prétraitement par une sialidase peut améliorer la détection dans certains types cellulaires.
• Ce produit est fourni sous forme de conjugué APC ; le manipuler avec précaution afin d’éviter la photodécoloration et utiliser des contrôles de compensation appropriés dans les panels multicolores.

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