Anticorps monoclonal APC anti-souris CD163 pour cytométrie en flux - Q2VLH6

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD163

• CD163, également appelé protéine M130 de type 1 riche en cystéine du récepteur scavenger, est un membre de la superfamille des récepteurs scavenger riches en cystéine (SRCR). Il est exprimé principalement sur les monocytes et les macrophages matures, notamment les cellules de Kupffer dans le foie, les macrophages de la pulpe rouge de la rate et les macrophages des ganglions lymphatiques mésentériques.
• La protéine intervient dans la clairance et l'endocytose des complexes hémoglobine/haptoglobine (Hb/Hp) par les macrophages. Ce processus protège les tissus contre les dommages oxydatifs causés par l'hémoglobine libre et facilite le recyclage du fer par dégradation de l'hème.
• La liaison de CD163 aux complexes Hb/Hp est dépendante du calcium et du pH. Après la liaison au ligand, CD163 déclenche des cascades de signalisation intracellulaires impliquant la mobilisation du calcium dépendante de la tyrosine kinase et la production d'inositol triphosphate, conduisant à la sécrétion d'IL-6 et de CSF-1.
• Une forme soluble (sCD163) est générée par clivage de l'ectodomaine. Des niveaux élevés de sCD163 sont associés à des états inflammatoires, où il peut jouer un rôle anti-inflammatoire en agissant comme récepteur leurre.
• Structurellement, CD163 est une protéine transmembranaire de type I à passage unique avec un peptide signal, plusieurs domaines SRCR et une courte queue cytoplasmique. Il est fortement glycosylé et contient des liaisons disulfure, ce qui contribue à sa stabilité et à ses propriétés de liaison au ligand.
• Le gène humain de CD163 est localisé sur le chromosome 12p13.31, tandis que l'orthologue de souris se trouve sur le chromosome 6. La protéine subit un épissage alternatif, produisant des variants avec des différences fonctionnelles potentielles.
• CD163 est reconnu comme un marqueur de réponse de phase aiguë ; son expression est régulée à la hausse par des stimuli anti-inflammatoires (par exemple, les glucocorticoïdes, l'IL-10) et régulée à la baisse par des signaux pro-inflammatoires (par exemple, le LPS, le TNF-α).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour la cytométrie en flux, utilisez l'anticorps APC directement conjugué. Effectuez une titration pour déterminer la concentration de travail optimale pour votre type de cellule spécifique et vos conditions expérimentales, et incluez toujours un contrôle d'isotype approprié.
• Cet anticorps cible les acides aminés 39–260 du domaine extracellulaire, qui est accessible à la surface cellulaire. Il convient à la coloration de cellules vivantes sans perméabilisation.
• Validez la réactivité dans des échantillons de tissus de souris pertinents connus pour exprimer CD163, tels que la rate, le foie ou les ganglions lymphatiques. La digestion enzymatique peut améliorer la récupération des macrophages pour la coloration.
• Étant donné que l'expression de CD163 peut être modulée, envisagez de traiter les cellules avec de l'IL-10 ou des glucocorticoïdes pour améliorer la détection in vitro si les niveaux d'expression sont faibles.
• Utilisez un blocage des récepteurs Fc (par exemple, anti-CD16/CD32) avant la coloration pour minimiser la liaison non spécifique aux récepteurs Fc sur les macrophages.

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