Anticorps monoclonal APC anti-LGR5 pour cytométrie en flux - O75473

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de LGR5

• LGR5 (aussi appelée GPR49, GPR67 ou HG38) est un récepteur couplé aux protéines G riche en répétitions leucines, qui agit comme récepteur pour les R-spondines (RSPO1–RSPO4).
• Après liaison aux R-spondines, LGR5 potentialise la voie de signalisation canonique Wnt en s'associant à LRP6 phosphorylé et aux récepteurs frizzled, augmentant ainsi l'expression des gènes cibles de Wnt.
• Contrairement aux récepteurs classiques couplés aux protéines G, LGR5 n'active pas les protéines G hétérotrimériques pour transmettre les signaux.
• LGR5 est un marqueur de cellules souches bien établi de l'épithélium intestinal et du follicule pileux, jouant un rôle essentiel dans le développement et le maintien des cellules souches intestinales adultes au cours du développement post-embryonnaire.
• Le récepteur est principalement localisé au niveau de la membrane cellulaire, et il est également détecté dans l'appareil de Golgi et la membrane du réseau trans-Golgien.
• Son expression est observée dans le muscle squelettique, le placenta, la moelle épinière et diverses régions cérébrales ; au niveau de l'intestin, il marque les cellules souches à la base des cryptes de l'épithélium muqueux colique et grêle, et une surexpression est rapportée dans les cancers de l'ovaire, du côlon et du foie.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation N-liée et la formation de ponts disulfures. La protéine existe sous plusieurs isoformes du fait de l'épissage alternatif.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 480–580 de la LGR5 humaine, une région intracellulaire. Le conjugué APC permet une détection directe par cytométrie en flux sans anticorps secondaire.
• Pour la cytométrie en flux, nous recommandons de tester à la fois les protocoles de coloration de surface sur cellules vivantes et de coloration intracellulaire, car l'accessibilité de l'épitope peut varier ; une perméabilisation peut être nécessaire si l'épitope ciblé par l'anticorps n'est pas exposé à la surface extracellulaire.
• LGR5 est exprimée sur les populations de cellules souches ; une dissociation appropriée du tissu en suspension unicellulaire et un tri des cellules viables sont recommandés pour identifier précisément les cellules LGR5+.
• Validez l'anticorps dans votre système expérimental concerné (par exemple organoïdes intestinaux humains, lignées cellulaires cancéreuses ou tissu primaire) à l'aide de contrôles adaptés.

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