Anticorps monoclonal APC anti-intégrine alpha 5 (ITGA5/CD49e) pour cytométrie en flux - P08648

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l’intégrine alpha-5 (ITGA5/CD49e)

• L’intégrine alpha-5 (CD49e, sous-unité alpha du récepteur de la fibronectine, VLA-5) est un récepteur clé de l’adhésion. Elle forme des hétérodimères avec l’intégrine bêta-1 (ITGB1) afin de permettre l’adhésion cellulaire à la fibronectine, au fibrinogène et à la fibrilline-1, grâce à la reconnaissance de la séquence RGD. ITGA5:ITGB1 sert également de récepteur à l’interleukine-1 bêta (IL1B) et, avec ITGB3, participe à la signalisation CD40/CD40LG. De plus, l’intégrine interagit avec PLA2G2A afin de moduler sa propre activité de liaison aux ligands.
  Références associées :
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• La protéine se localise au niveau de la membrane cellulaire, des jonctions cellule-cellule et des adhérences focales, ce qui est cohérent avec son rôle dans l’adhésion et la migration cellulaires.

• Le profil d’expression tissulaire montre des niveaux détectables d’ITGA5 dans le placenta au niveau protéique.

• L’intégrine alpha-5 subit plusieurs modifications post-traductionnelles, notamment un clivage au niveau d’une paire de résidus basiques, une phosphorylation, la formation de ponts disulfure et une glycosylation liée à l’azote. Elle contient des motifs de liaison au calcium essentiels à la fonction de l’intégrine.

• ITGA5 est impliquée dans la pathogenèse microbienne : elle agit comme récepteur cellulaire du métapneumovirus humain, du parvovirus humain B19 (via le complexe ITGA2:ITGB1) et de la protéine Tat du VIH-1 dans les lésions du sarcome de Kaposi.

• La protéine mature présente un poids moléculaire prédit d’environ 114,5 kDa (UniProt), ce qui concorde avec la bande observée autour de 115 kDa en électrophorèse sur gel.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre le domaine extracellulaire (acides aminés 42-995) de l’ITGA5 humaine, ce qui suggère que l’anticorps reconnaît probablement un épitope extracellulaire. Il est donc particulièrement adapté aux applications de cytométrie en flux nécessitant un marquage de surface sur des cellules vivantes.
• L’anticorps est directement conjugué à l’APC, ce qui élimine la nécessité d’une étape avec un anticorps secondaire dans les essais de FC. Vérifiez la compatibilité de l’instrument avec le fluorophore APC et effectuez un titrage optimal afin de minimiser le bruit de fond.
• La réactivité croisée rapportée avec l’ITGA5 humaine et de souris permet une utilisation potentielle dans des études de xénogreffes ou sur des modèles murins ; toutefois, une validation indépendante dans le système d’échantillons concerné est recommandée.
• Pour la cytométrie en flux, incluez des contrôles d’isotype appropriés et utilisez un colorant de viabilité pour exclure les cellules mortes. Envisagez des essais dans des systèmes d’expression natifs et recombinants afin de confirmer la spécificité.

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