Anticorps Monoclonal APC Anti-Human CD163 pour Cytométrie en Flux - Q86VB7

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du CD163

• Le CD163, également connu sous le nom de protéine 1 de type riche en cystéine du récepteur éboueur M130 ou de récepteur éboueur de l'hémoglobine, est un membre de la superfamille des récepteurs ébouveurs riches en cystéine (SRCR). Il est codé par le gène CD163 (ID de gène : 9332) et existe sous plusieurs isoformes générées par épissage alternatif. L'isoforme 1 est la moins abondante dans le sang, tandis que l'isoforme 3 est l'isoforme prédominante détectée dans le sang.
• Le récepteur joue un rôle critique dans l'élimination médiée par les macrophages des complexes hémoglobine/haptoglobine, protégeant ainsi les tissus des dommages oxydatifs induits par l'hémoglobine libre. Il se lie à ces complexes de manière dépendante du calcium et du pH, avec une affinité plus élevée pour les complexes contenant de l'haptoglobine multimérique (phénotype HP*1F) par rapport à l'haptoglobine dimérique (phénotype HP*1S).
• Lors de la liaison du ligand, le CD163 déclenche une signalisation intracellulaire impliquant une mobilisation du calcium dépendante des tyrosines kinases et la production d'inositol triphosphate, conduisant à la sécrétion d'IL-6 et de CSF-1. L'isoforme 3 présente la capacité la plus élevée d'endocytose des ligands et d'expression de surface.
• Suite au clivage protéolytique, la forme soluble (sCD163) agit comme un médiateur anti-inflammatoire et sert de marqueur diagnostique de l'activation des macrophages dans diverses conditions inflammatoires.
• La localisation subcellulaire comprend la membrane cellulaire en tant que protéine transmembranaire de type I à passage unique, ainsi que la sécrétion sous forme d'ectodomaine soluble après clivage.
• Le CD163 est spécifiquement exprimé dans les monocytes et les macrophages tissulaires matures, y compris les cellules de Kupffer dans le foie, les macrophages de la pulpe rouge de la rate, les macrophages corticaux du thymus, les macrophages résidents de la moelle osseuse et les macrophages méningés du système nerveux central.
• La protéine est glycosylée et contient plusieurs domaines SRCR, une hélice transmembranaire et une queue cytoplasmique. Elle est classée comme une protéine de phase aiguë et est impliquée dans la régulation des réponses inflammatoires.

Conseils Expérimentaux et Techniques

• Cet anticorps conjugué à l'APC est conçu pour la détection par cytométrie en flux du CD163 humain. Comme le CD163 est abondamment exprimé sur les monocytes et les macrophages, envisagez des stratégies de gating incluant ces populations cellulaires.
• Pour un marquage optimal, effectuez une titration de l'anticorps pour déterminer la concentration appropriée. L'APC est un fluorochrome brillant ; assurez-vous d'un réglage correct de la compensation, en particulier lors du co-marquage avec d'autres fluorochromes.
• Comme le CD163 est clivé de la surface cellulaire, envisagez d'utiliser un anticorps anti-CD163 qui reconnaît le domaine extracellulaire pour un marquage de surface fiable. L'immunogène utilisé pour cet anticorps étant une protéine recombinante, il se lie probablement à la partie extracellulaire.
• Incluez des contrôles d'isotype appropriés et des colorants de viabilité dans votre panneau de cytométrie en flux pour exclure les cellules mortes ou les liaisons non spécifiques. Validez l'anticorps dans votre système expérimental spécifique, car les niveaux d'expression peuvent varier en fonction de l'activation cellulaire ou de l'état pathologique.

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