Anticorps monoclonal anti-humain CD101/IGSF2 conjugué à l'APC pour la cytométrie en flux - Q93033

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD101/IGSF2

• CD101, également connu sous le nom de membre 2 de la superfamille des immunoglobulines (IGSF2) ou glycoprotéine de surface cellulaire V7 (EWI-101), est une protéine membranaire de type I à un seul passage appartenant à la superfamille des immunoglobulines.
• Il agit comme un régulateur négatif de l'activation des lymphocytes T, inhibant la prolifération induite par CD3, l'expression d'IL2RA et la sécrétion d'IL2 par la suppression des tyrosine kinases et de la phosphorylation de la phospholipase C-gamma-1.
• CD101 empêche la translocation nucléaire de NFAT, bloquant ainsi la signalisation calcique en aval et la production de cytokines dans les lymphocytes T.
• De plus, CD101 contribue à l'inhibition de la prolifération des lymphocytes T via la sécrétion d'IL10 par les cellules dendritiques cutanées, indiquant un rôle dans la tolérance périphérique.
• La protéine est largement exprimée dans les poumons, le thymus et l'intestin grêle, et est détectée sur les cellules dendritiques cutanées, les lymphocytes T activés, les monocytes, les granulocytes et certaines cellules leucémiques (par exemple, les cellules tumorales blastiques CD4+ CD56+).
• Au niveau subcellulaire, CD101 est localisée à la membrane et contient de multiples domaines de type immunoglobuline, une hélice transmembranaire, des ponts disulfure et des sites de glycosylation.
• Compte tenu de ses fonctions immunomodulatrices, CD101 peut servir de marqueur pour des sous-ensembles spécifiques de cellules dendritiques et de cellules tumorales leucémiques, avec une pertinence potentielle dans la recherche en immuno-oncologie et sur les maladies auto-immunes.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond au domaine extracellulaire (aa 21-410) du CD101 humain, ce qui rend cet anticorps adapté à la détection du CD101 exprimé en surface sur des cellules vivantes par cytométrie en flux.
• Étant donné que CD101 est exprimé sur les lymphocytes T activés mais pas sur les lymphocytes T au repos, envisagez d'utiliser des cellules mononucléées du sang périphérique humain (PBMC) activées in vitro ou des lignées cellulaires telles que Jurkat (avec une stimulation appropriée) comme témoins positifs.
• Le conjugué APC fourni permet une détection directe sans anticorps secondaire ; les titrages de départ typiques pour la cytométrie en flux varient de 0,5 à 5 µg/mL, mais la concentration optimale doit être déterminée empiriquement.
• Pour la coloration intracellulaire ou l'analyse des produits de clivage de CD101, une validation supplémentaire peut être nécessaire, car cet anticorps cible la région extracellulaire.
• Étant donné la masse moléculaire relative d'environ 115 kDa, confirmez l'expression du CD101 de pleine longueur par western blot si nécessaire, bien que ce produit soit principalement validé pour la cytométrie en flux.

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