Anticorps Monoclonal Anti-CD25 APC pour Cytométrie en Flux - P01590

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du CD25

• La sous-unité alpha du récepteur de l'interleukine-2 (CD25), également connue sous le nom de p55, est codée par le gène Il2ra chez la souris et constitue un composant clé du récepteur de l'IL-2 à haute affinité, essentiel pour une bonne homéostasie immunitaire.
• Le CD25 est exprimé de manière constitutive à des niveaux élevés sur les cellules T régulatrices (TREGs) et est critique pour leur fonction dans le maintien de la tolérance immunitaire en supprimant l'activation et l'expansion des cellules T autoréactives.
• La protéine est une glycoprotéine membranaire de type I à passage unique avec une région extracellulaire contenant deux domaines sushi (CCP/SCR) qui facilitent la liaison du ligand et la formation du complexe récepteur.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation N-liée et la formation de ponts disulfure, qui sont importantes pour le repliement correct et la stabilité du domaine extracellulaire.
• La localisation subcellulaire se situe principalement au niveau de la membrane plasmique, avec une courte queue cytoplasmique impliquée dans la transduction du signal lors de l'engagement de l'IL-2.
• Le CD25 est également régulé à la hausse de manière transitoire sur les cellules T conventionnelles activées, les cellules B et les cellules NK, servant de marqueur précoce d'activation.

Conseils Expérimentaux et Techniques

• L'immunogène couvre le domaine extracellulaire (acides aminés 22-236) du CD25 de souris, ce qui est censé générer des anticorps reconnaissant le récepteur de surface natif, bien adaptés aux applications de cytométrie en flux.
• Pour la cytométrie en flux, titrez l'anticorps pour déterminer la concentration optimale pour votre type cellulaire spécifique et vos conditions expérimentales, en utilisant des témoins positifs (par exemple, cellules T activées) et négatifs pertinents.
• Le marquage de surface peut être effectué sur des cellules vivantes, non fixées ; évitez la fixation avec des réactifs qui pourraient altérer le fluorophore APC ou l'accessibilité de l'épitope, sauf si cela est validé.
• Envisagez un marquage simultané avec des marqueurs tels que Foxp3 (intracellulaire) ou CD4 pour identifier les sous-ensembles Treg ou les cellules T activées dans des échantillons murins.

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