Anticorps polyclonal de lapin anti-ZWINT pour WB, IF/ICC, ELISA - O95229

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de ZWINT

• ZWINT, également connu sous les noms SIP30, ZWINT1, KNTC2AP et HZwint-1, est un composant du complexe KNL1 du kinétochore externe qui sert de point d'ancrage pour les composants du point de contrôle de l'assemblage du fuseau mitotique et médie les interactions entre microtubules et kinétochore. Références associées : PMID:15094189 PMID:15485811 PMID:15824131
• C'est une sous-unité du réseau KMN (complexes MIS12, NDC80, KNL1) qui constitue le kinétochore externe, reliant l'ADN centromérique aux microtubules du fuseau et recrutant les protéines du point de contrôle mitotique. Références associées : PMID:15094189 PMID:15485811 PMID:15824131
• ZWINT cible le complexe RZZ vers le kinétochore en prométaphase (PubMed:15485811) et recrute MAD2L1 (par similarité), contribuant à l'activation du point de contrôle de l'assemblage du fuseau mitotique. Références associées : PMID:15485811
• Au-delà de la mitose, ZWINT est essentiel pour l'alignement des chromosomes homologues pendant la métaphase I méiotique et active le point de contrôle de l'assemblage du fuseau au niveau des kinétochores non attachés pendant la méiose I. Références associées : PMID:15485811
• Au niveau sous-cellulaire, ZWINT se localise dans le noyau, plus précisément dans la région centromère-kinétochore des chromosomes, ce qui est cohérent avec son rôle dans la ségrégation chromosomique.
• La protéine contient un domaine en bobine superenroulée, elle est sujette à l'épissage alternatif et sa structure 3D a été partiellement résolue (Mots-clés UniProt).
• En tant que composant clé du kinétochore, ZWINT est impliqué dans la régulation du cycle cellulaire, la mitose et la biologie des chromosomes, ce qui est confirmé par son identification dans des études protéomiques.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène est une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 1 à 277 de ZWINT humain (NP_008988.2), correspondant à la région N-terminale qui inclut les domaines fonctionnels. Envisagez d'utiliser cet anticorps pour détecter les isoformes de pleine longueur et les isoformes issues d'épissage alternatif.
• Pour le Western blotting, le poids moléculaire prédit est d'environ 31 kDa. Incluez des lysats de contrôle positif appropriés provenant de cellules mitotiques ou de tissus exprimant ZWINT, et validez la taille de la bande dans votre système échantillon.
• En immunofluorescence/ICC, attendez-vous à un marquage ponctué du kinétochore pendant la prométaphase et la métaphase dans les cellules en division. Contre-coloriez l'ADN pour visualiser les chromosomes et confirmer la localisation.
• Pour l'ELISA, optimisez les concentrations d'antigène de revêtement et d'anticorps en utilisant la protéine ZWINT recombinante ou des lysats cellulaires comme standard.
• Une réactivité croisée avec l'homme, la souris et le rat a été rapportée ; cependant, validez-la dans l'espèce spécifique et le contexte expérimental pour garantir la spécificité.

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