Anticorps polyclonal anti-ZFYVE9 pour WB et ELISA - O95405

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de ZFYVE9

• ZFYVE9 (Zinc finger FYVE domain-containing protein 9), également connue sous le nom de SARA (Smad anchor for receptor activation), est une protéine adaptatrice endosomale précoce appartenant à la famille des protéines contenant un domaine FYVE.
• Elle fonctionne principalement dans la voie de signalisation TGF-β en recrutant SMAD2 et SMAD3 vers le récepteur TGF-β au niveau de la membrane de l'endosome précoce, facilitant leur phosphorylation et leur translocation nucléaire ultérieure.
• La protéine module l'activité transcriptionnelle du complexe SMAD3/SMAD4, régulant ainsi l'expression des gènes en aval en réponse à la stimulation par le TGF-β.
• ZFYVE9 peut également être impliquée dans l'internalisation du récepteur TGF-β, contribuant à l'atténuation du signal et au trafic des récepteurs.
• Sur le plan subcellulaire, ZFYVE9 est localisée dans le cytoplasme et spécifiquement sur la face cytoplasmique de la membrane de l'endosome précoce, où son domaine FYVE se lie au phosphatidylinositol 3-phosphate.
• L'expression est ubiquitaire, mais dans le cerveau, elle se trouve principalement dans les cellules musculaires lisses cérébrovasculaires et les astrocytes réactifs, ce qui suggère des rôles spécifiques aux tissus.
• La protéine subit un épissage alternatif et est classée comme une phosphoprotéine, avec un domaine en doigt de zinc qui médie la coordination des ions métalliques, essentielle pour sa localisation endosomale.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé pour cet anticorps correspond aux 260 acides aminés N-terminaux ; cette région peut être moins conservée entre les variants d'épissage, il convient donc de valider la détection de votre isoforme cible dans les lysats cellulaires pertinents.
• Pour le Western blotting, une bande proche de 156 kDa est attendue ; utilisez un pourcentage de gel et des conditions de transfert appropriés pour les protéines de haut poids moléculaire, et incluez un contrôle positif tel qu'un lysat cellulaire HeLa ou HEK293.
• En ELISA, effectuez un revêtement avec la protéine ZFYVE9 recombinante ou un peptide issu de la séquence de l'immunogène ; titrez l'anticorps pour déterminer la concentration de travail optimale et confirmez la spécificité avec un puits non revêtu.
• En tant qu'anticorps polyclonal, il peut reconnaître plusieurs épitopes ; envisagez de tester la cohérence entre les lots si vous l'utilisez pour des dosages quantitatifs, et incluez toujours des contrôles appropriés.

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