Anticorps polyclonal anti-ZAP70 pour WB, IF/ICC, ELISA - P43403

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de ZAP70

• ZAP70 (Tyrosine-protéine kinase ZAP-70) est une protéine associée à la chaîne zêta de 70 kDa, également connue sous le nom de tyrosine kinase apparentée à Syk, codée par le gène ZAP70 (SRK).
• Joue un rôle essentiel dans la réponse immunitaire adaptative en régulant la motilité des lymphocytes T, l'adhésion, l'expression des cytokines et le développement des thymocytes. Lors de l'activation du TCR, ZAP70 est recrutée sur les chaînes CD3 phosphorylées via les motifs ITAM au niveau de la membrane plasmique. Références associées : PMID:7509083
• La localisation subcellulaire est principalement cytoplasmique, avec une translocation vers la membrane cellulaire après l'engagement du TCR.
• L'expression tissulaire est limitée aux lymphocytes T, aux cellules tueuses naturelles (NK), aux thymocytes précoces et aux cellules pro/pré-B.
• Contient des domaines SH2 en tandem N-terminaux et un domaine kinase C-terminal ; subit une phosphorylation sur de multiples résidus tyrosine et une acétylation.
• Également nécessaire à l'internalisation et à la dégradation du TCR par interaction avec les ubiquitine ligases E3, modulant ainsi l'arrêt de l'activation des lymphocytes T.
• Contribue au développement et à l'activation des lymphocytes B primaires par la signalisation du récepteur des lymphocytes B.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 1-300 de la ZAP70 humaine (région N-terminale), incluant les domaines SH2 ; la réactivité contre des isoformes plus courtes ou des variants d'épissage doit être vérifiée expérimentalement.
• Pour le Western blot, envisagez d'utiliser des lysats cellulaires complets de Jurkat ou de PBMC humains ; les lysats de splénocytes de souris ou de rat peuvent également convenir compte tenu de la réactivité croisée rapportée.
• En immunofluorescence/ICC, validez les conditions de fixation et de perméabilisation dans le système d'échantillon pertinent, car la protéine peut être cytosolique ou associée à la membrane.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter une optimisation des conditions de revêtement et de la dilution de l'anticorps ; l'inclusion d'une étape de blocage avec la protéine ZAP70 recombinante pourrait aider à évaluer la spécificité.

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