Anticorps polyclonal de lapin anti-YTHDF2 pour WB, IHC, IF - Q9Y5A9

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de YTHDF2

• YTHDF2 est une protéine lectrice de la N6-méthyladénosine (m6A) qui se lie spécifiquement aux ARN contenant de la m6A et régule leur stabilité. Références associées : PMID:24284625, PMID:26046440, PMID:26318451
• Il favorise la dégradation des ARNm portant de la m6A via la déadénylation par le complexe CCR4-NOT ou le clivage endoribonucléolytique par la ribonucléase P/MRP, selon le contexte moléculaire. Références associées : PMID:27558897, PMID:30930054
• Les paralogues YTHDF (YTHDF1, YTHDF2, YTHDF3) partagent des ARNm cibles et agissent de manière redondante dans la dégradation des ARNm et la différenciation cellulaire. Références associées : PMID:28106072, PMID:32492408
• Au niveau subcellulaire, YTHDF2 est localisé dans le cytosol, les corps P, les granules de stress et le noyau, et il subit une séparation de phase liquide-liquide pour former des compartiments sans membrane. Références associées : PMID:31292544, PMID:31388144, PMID:31642031
• Fortement exprimé dans les cellules souches pluripotentes induites (iPSC) et régulé négativement lors de la différenciation neurale, il inhibe la spécification neurale en favorisant la dégradation des ARNm neuraux spécifiques méthylés. Références associées : PMID:32169943
• YTHDF2 régule également le métabolisme lipidique hépatique circadien, l'immunité antivirale innée, l'entrée en mitose et la spermatogenèse via la dégradation des ARNm dépendante de la m6A. Références associées : PMID:30428350, PMID:30559377, PMID:32267835
• Pendant l'infection virale, YTHDF2 peut favoriser l'expression génique et la réplication du SV40 et du KSHV en se liant aux ARN viraux modifiés par m6A. Références associées : PMID:29447282, PMID:29659627

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la région N-terminale (aa 1–200) de YTHDF2 humain ; tenez compte de cette localisation de l'épitope lors de la conception de tests multiplex ou lors de l'utilisation de standards de protéines tronquées.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 62 kDa ; incluez des lysats de contrôle positifs appropriés (par ex. HeLa, HEK293T) et optimisez la charge protéique pour obtenir une détection claire.
• En immunofluorescence (IF/ICC, IF-P), fixez et perméabilisez les cellules en fonction de la localisation cytosolique et granulaire de la cible ; validez les profils de coloration sur des lignées cellulaires positives et négatives connues.
• Pour l'immunohistochimie sur coupes de paraffine (IHC-P), testez les conditions de récupération d'antigène (par ex. tampon citrate pH 6,0 ou EDTA pH 9,0) et effectuez un titrage de l'anticorps pour réduire le bruit de fond.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec YTHDF2 de souris et de rat, ce qui permet des études translationnelles dans des modèles rongeurs ; confirmez l'homologie de séquence si une spécificité absolue est requise.
• Étant donné que YTHDF2 se lie aux ARNs modifiés par m6A, envisagez de traiter les cellules avec des inhibiteurs de méthylation ou de la RNase lors de l'évaluation de la spécificité du signal dans des contextes dépendants de l'ARN.

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