Anticorps monoclonal lapin anti-YOD1 (WB, ELISA) - Q5VVQ6

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de YOD1

• YOD1 est une ubiquitine thioestérase appartenant à la famille OTU des déubiquitinases, dont les alias alternatifs sont DUBA-8, OTUD2 et HIN-7.
• Elle agit en tant qu'hydrolase qui élimine l'ubiquitine conjuguée des protéines, jouant un rôle essentiel dans la dégradation associée au réticulum endoplasmique (ERAD) des protéines luminales mal repliées.
• YOD1 peut couper les chaînes d'ubiquitine sur les substrats pour faciliter leur passage à travers le pore VCP/p97, car les fractions d'ubiquitine peuvent générer un obstacle stérique au threadage.
• L'enzyme présente une spécificité de liaison, clivant les chaînes de polyubiquitine liées aux résidus Lys-27, Lys-29, Lys-33 et Lys-11.
• YOD1 est impliquée dans la macroautophagie, notamment dans l'élimination des lysosomes endommagés en recrutant PLAA, UBXN6 et VCP sur les membranes lysosomales ubiquitinées par K48. Références associées : PMID:27753622
• Elle est principalement localisée dans le cytoplasme et contient un domaine doigt de zinc, ce qui la classe comme une thiol protéase liant les métaux.
• L'épissage alternatif du gène YOD1 produit plusieurs isoformes, et son poids moléculaire est d'environ 38 kDa.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blotting, envisagez de tester une gamme de dilution standard de l'anticorps (par exemple 1:500-1:2000) et optimisez le protocole avec des lysats issus de votre système cellulaire ou tissulaire spécifique exprimant YOD1.
• Étant donné que l'immunogène est un peptide du domaine OTU (aa 249-348), confirmez la spécificité de l'anticorps en incluant des contrôles par knock-out de YOD1 ou par extinction par ARNsi.
• Les performances en ELISA peuvent nécessiter une optimisation de la concentration de l'antigène de revêtement et des conditions d'incubation de l'anticorps ; des titrages en échiquier préliminaires sont recommandés.
• Le poids moléculaire prédit de YOD1 est d'environ 38 kDa ; une bande proche de cette taille est attendue sur SDS-PAGE en conditions réductrices, mais des modifications post-traductionnelles ou des isoformes peuvent déplacer la masse apparente.

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