Anticorps monoclonal Anti-XPD/ERCC2 pour WB, IHC-P, ELISA - P18074

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de XPD/ERCC2

• La protéine XPD/ERCC2 est une ADN hélicase ATP-dépendante 5'-3' qui constitue un composant central du complexe facteur général de transcription et de réparation de l'ADN IIH (TFIIH), jouant un rôle essentiel dans la réparation par excision de nucléotides (NER) et l'initiation de la transcription. Références associées : PMID:31253769, PMID:8413672, PMID:9771713
• Dans la NER couplée à la transcription, XPD/ERCC2 reconnaît les bases d'ADN endommagées et est séquestré dans la chromatine sur l'ADN endommagé par les UV ; l'activité hélicase ATP-dépendante est essentielle pour l'ouverture de l'ADN autour de la lésion. Références associées : PMID:17466626, PMID:23352696, PMID:9771713
• Lors de l'initiation de la transcription par l'ARN polymérase II, XPD/ERCC2 agit comme un pont structurel entre le module kinase activateur de CDK (CAK) et le complexe core-TFIIH, et son activité hélicase est requise pour l'ouverture et l'échappement du promoteur ; des changements conformationnels importants se produisent entre les complexes de NER et de transcription. Références associées : PMID:10024882, PMID:31253769, PMID:33902107, PMID:17466626
• Au-delà de ses rôles dans la réparation de l'ADN et la transcription, XPD/ERCC2 participe à la ségrégation des chromosomes en tant que composant du complexe MMXD associé au fuseau mitotique, et régule l'activité du récepteur de la vitamine D.
• La localisation subcellulaire comprend le noyau, le cytoplasme et le cytosquelette (fuseau), ce qui est cohérent avec ses rôles dans la transcription, la réparation de l'ADN et la mitose.
• XPD/ERCC2 contient un cluster fer-soufre 4Fe-4S et un domaine de liaison à l'ATP ; des mutations sont associées aux phénotypes de xéroderme pigmentaire, de syndrome de Cockayne et de trichothiodystrophie.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes, et la protéine est soumise à la conjugaison de l'ubiquitine.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à une séquence située entre les acides aminés 600 et 700 de XPD/ERCC2 humain ; il faut considérer que cette région est probablement conservée entre les espèces, ce qui contribue à la réactivité croisée observée avec la souris et le rat.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 87 kDa est attendue ; validez la bande spécifique en la comparant à des marqueurs de poids moléculaire connus et en utilisant des contrôles appropriés.
• En immunohistochimie sur coupes incluses en paraffine (IHC-P), des protocoles de récupération d'antigène peuvent être nécessaires pour une détection optimale ; il est recommandé de réaliser un test pilote avec des tissus contrôles.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour capturer ou détecter des peptides de XPD/ERCC2 ou la protéine recombinante ; il est conseillé d'optimiser la concentration de revêtement et le format de détection.

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