Anticorps monoclonal de lapin anti-WT1 pour WB, IHC-P, ELISA - P19544

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de WT1

• WT1 (protéine 1 de la tumeur de Wilms, également connue sous le nom de WT33) est un facteur de transcription avec de multiples isoformes générées par épissage alternatif, incluant les variants avec insertion KTS. La protéine contient quatre domaines doigts de zinc en C-terminal qui médient la liaison à l'ADN.
• Il reconnaît la séquence consensus d'ADN 5'-GCG(T/G)GGGCG-3' et régule des gènes cibles tels que l'EPO, jouant un rôle crucial dans le développement du système urogénital. Références associées : PMID:7862533 PMID:17716689 PMID:25258363
• WT1 présente des rôles doubles dépendants du contexte en tant que suppresseur de tumeur et oncogène dans divers cancers, avec des fonctions spécifiques aux isoformes.
• Les isoformes dépourvues du motif KTS fonctionnent principalement comme facteurs de transcription, tandis que les isoformes contenant le KTS peuvent interagir avec l'ARNm et participer au métabolisme ou à l'épissage de l'ARNm. Références associées : PMID:15520190 PMID:16934801 PMID:19123921
• La localisation subcellulaire inclut le noyau, le nucléole, le nucléoplasme, les taches nucléaires et le cytoplasme, reflétant ses divers rôles fonctionnels.
• Exprimée principalement dans le rein et un sous-ensemble de cellules hématopoïétiques, ce qui correspond à son implication dans le développement et les malignités rénales et hématologiques.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'ubiquitination (conjugaison Ubl) et la coordination d'ions métalliques par les domaines doigts de zinc, essentielles pour la liaison à l'ADN et l'activité transcriptionnelle.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 60–250 de WT1 humain, couvrant le domaine régulateur N-terminal en amont de la région des doigts de zinc. Cette conception peut favoriser la reconnaissance d'isoformes spécifiques ou d'états d'activation ; validez le profil de réactivité dans votre contexte expérimental.
• Le poids moléculaire prédit est d'environ 49 kDa ; confirmez la taille de la bande par WB dans des lysats pertinents (par ex., lignées cellulaires rénales) et tenez compte des éventuelles modifications post-traductionnelles pouvant causer des décalages.
• Pour l'IHC-P, les protocoles de démasquage antigénique (par ex., démasquage thermique) doivent être optimisés, et l'expression dans les tissus rénaux, testiculaires ou tumoraux peut servir de contrôle positif.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec WT1 de souris et de rat, permettant des études translationnelles dans des modèles rongeurs ; cependant, une validation dans chaque espèce est recommandée.
• Pour les applications ELISA, il est conseillé de l'apparier avec un anticorps de détection ciblant un épitope non chevauchant pour assurer la spécificité du test.

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