Anticorps polyclonal anti-WT1 pour WB, IHC-P, ELISA - P19544

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de WT1

• WT1 se lie à la séquence d'ADN 5'-GCG(T/G)GGGCG-3' pour réguler l'expression des gènes cibles, y compris EPO, et est essentiel au développement du système urogénital. Références associées : PMID:7862533 PMID:17716689 PMID:25258363
• La protéine présente des fonctions à la fois de suppresseur de tumeur et d'oncogène selon le contexte cellulaire.
• WT1 possède de multiples isoformes avec des activités distinctes. Les isoformes dépourvues du motif KTS fonctionnent comme facteurs de transcription, tandis que celles contenant le KTS peuvent se lier à l'ARNm et participer au traitement ou à l'épissage de l'ARN. Références associées : PMID:15520190 PMID:16934801
• L'isoforme 1 a une affinité de liaison à l'ADN plus faible et peut se lier à l'ARN. Références associées : PMID:19123921
• WT1 est principalement localisé dans le noyau, y compris le nucléole, le nucléoplasme et les speckles nucléaires, mais peut également être trouvé dans le cytoplasme.
• Il est exprimé dans le rein et un sous-ensemble de cellules hématopoïétiques.
• La protéine contient des domaines à doigt de zinc et participe à l'édition de l'ARN, à l'épissage alternatif et à la conjugaison ubl, ce qui correspond à ses rôles dans la transcription et le métabolisme de l'ARN.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire attendu est d'environ 49 kDa. Pensez à inclure des inhibiteurs de protéases pour prévenir la dégradation.
• L'immunogène correspond à la région N-terminale (aa 1-302), présente dans de multiples isoformes de WT1. Cet anticorps peut détecter diverses isoformes ; validez les profils de bandes en utilisant des lignées cellulaires ou des tissus pertinents.
• Pour l'IHC-P, optimisez la récupération antigénique et incluez des contrôles tissulaires appropriés (par exemple, rein ou tumeurs WT1-positives).
• En ELISA, utilisez l'anticorps comme réactif de capture ou de détection en suivant les protocoles standards ; confirmez la spécificité avec la protéine WT1 recombinante.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat suggère une utilité potentielle dans les modèles rongeurs ; validez toujours dans le système expérimental spécifique.
• Évitez les cycles répétés de congélation-décongélation pour préserver l'intégrité de l'anticorps.

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