Anticorps polyclonal de lapin anti-WRN pour WB, ELISA - Q14191

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de WRN

• WRN code pour une enzyme multifonctionnelle possédant une activité hélicase ADN 3'–5' dépendante du magnésium et de l'ATP sur des substrats partiellement duplex, et une activité exonucléase 3'–5' sur l'ADN double brin avec un surplomb 5' (pas d'activité sur l'ADN simple brin ou l'ADN double brin à extrémités franches). Références associées : PMID:9224595, PMID:9288107, PMID:9611231, PMID:11863428
• La protéine se lie et déroule préférentiellement des structures secondaires alternatives de l'ADN comme les fourches de réplication, les jonctions de Holliday et l'ADN G-quadruplex (par ex., les répétitions d(CGG)n), facilitant la progression de la fourche de réplication et prévenant l'instabilité génomique. Références associées : PMID:10212265
• WRN est essentielle pour la réparation des cassures double brin de l'ADN après une irradiation gamma et pour la formation des centres focaux de réplication de l'ADN ; son épuisement entraîne des cassures chromosomiques et une instabilité génomique sévère. Références associées : PMID:9224595, PMID:9288107, PMID:9611231, PMID:33199508
• La protéine se localise principalement dans le noyau, y compris le nucléole, le nucléoplasme et les régions chromosomiques, ce qui est cohérent avec ses fonctions dans le métabolisme de l'ADN.
• WRN subit de multiples modifications post-traductionnelles (acétylation, phosphorylation, ubiquitination) qui régulent probablement ses activités hélicase/exonucléase et ses interactions protéine-protéine.
• Les mutations de WRN provoquent le syndrome de Werner, une maladie de vieillissement prématuré autosomique récessive caractérisée par une instabilité génomique et une prédisposition au cancer.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (aa 1223–1432) se situe dans la région C‑terminale, en dehors du domaine hélicase conservé, ce qui peut réduire la réactivité croisée avec d'autres membres de la famille RecQ.
• Pour le Western blot, attendez-vous à une bande proche de 162 kDa ; utilisez un marqueur de poids moléculaire élevé et un gel à faible pourcentage (par ex., SDS‑PAGE 6%) pour une séparation optimale.
• Validez la spécificité de l'anticorps dans des lignées cellulaires humaines pertinentes (par ex., HeLa, HEK293) en utilisant un contrôle de knockdown ou un lysat positif connu.
• En ELISA, optimisez le revêtement avec l'immunogène recombinant ou la protéine WRN pleine longueur, et envisagez un format compétitif pour une spécificité accrue.

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