Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-WNK1 pour WB et ELISA - Q9H4A3

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de WNK1

• WNK1 (Protéine kinase 1 déficiente en lysine) est une sérine/thréonine-protéine kinase qui agit comme le régulateur principal de la cascade kinase WNK-SPAK/OSR1, contrôlant de manière critique l'activité des co-transporteurs d'ions et la pression artérielle systémique (PubMed:15883153, PubMed:17190791, PubMed:31656913).
  Références associées : PMID:15883153, PMID:17190791, PMID:31656913
• Sous stress hyperosmotique, WNK1 agit comme un capteur moléculaire d'encombrement, subissant une séparation de phases liquide-liquide pour former des compartiments sans membrane qui concentrent WNK1 avec ses substrats OXSR1/OSR1 et STK39/SPAK, augmentant ainsi la phosphorylation en aval et l'augmentation régulatrice du volume (PubMed:36318922).
  Références associées : PMID:36318922
• Au-delà de sa cascade kinase canonique, WNK1 exerce des fonctions dépendantes de la kinase dans l'angiogenèse en activant OXSR1/OSR1 pour le chimiotactisme et STK39/SPAK pour la prolifération des cellules endothéliales (PubMed:25362046), et phosphoryle des substrats supplémentaires tels que SYT2, PCF11 et NEDD4L pour réguler respectivement la liaison des vésicules synaptiques, l'export d'ARNm (PubMed:29196535) et la stabilité des protéines membranaires.
  Références associées : PMID:25362046, PMID:29196535
• Un isoforme spécifique du rein défectueux en activité kinase agit comme un régulateur dominant-négatif de la WNK1 pleine longueur, modulant l'équilibre sodium-potassium dans le néphron distal, tandis que les fonctions d'échafaudage indépendantes de la kinase de WNK1 contrôlent la localisation membranaire de divers transporteurs et canaux tels que SLC4A4, SLC26A6, TRPV4 et CFTR, et favorisent l'activation de SGK1 via le recrutement de mTORC2 (PubMed:14645531, PubMed:36373794).
  Références associées : PMID:14645531, PMID:36373794
• WNK1 est largement exprimée avec les niveaux les plus élevés dans les testicules, le cœur, les reins et les muscles squelettiques, et montre une présence spécifique dans les ganglions de la racine dorsale et les tubules distaux/connecteurs du rein, ce qui correspond à ses rôles dans la nociception et l'homéostasie électrolytique.
• Au niveau subcellulaire, WNK1 se localise dans le cytoplasme, le noyau et le fuseau mitotique, et participe à la réorganisation du cytosquelette d'actine, à l'abscission mitotique et à la régulation négative de l'autophagie (PubMed:10660600, PubMed:21220314, PubMed:27911840).
  Références associées : PMID:10660600, PMID:21220314, PMID:27911840
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation, l'ubiquitination et la glycosylation ; la protéine est également sensible au chlorure, avec des mutations liées à la neuropathie sensitive et autonome héréditaire de type II (HSAN2) et au pseudo-hypoaldostéronisme.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• L'immunogène correspond à la région N-terminale (aa 1-210) de la WNK1 humaine, qui peut reconnaître à la fois les isoformes pleine longueur et spécifiques du rein – validez la détection dans les lysats de cellules ou de tissus pertinents.
• Pour le Western blot, une bande proche de 250 kDa est attendue ; cependant, plusieurs isoformes et des produits de clivage potentiels peuvent être observés. Envisagez d'utiliser des inhibiteurs de protéases frais et des conditions de transfert optimisées pour les protéines de haut poids moléculaire.
• Les applications ELISA peuvent bénéficier de l'utilisation de la protéine ou du peptide recombinant purifié comme contrôle positif pour établir la sensibilité et la spécificité du test.
• Une réactivité croisée avec la souris et le rat a été rapportée ; vérifiez la réactivité dans votre espèce d'intérêt avec des contrôles appropriés (par exemple, lysats de knockout ou peptide bloquant) lorsque cela est possible.
• Lors de l'étude de la signalisation dépendante de la phosphorylation, notez que cet anticorps polyclonal n'est pas phospho-spécifique ; associez-le à des anticorps phospho-spécifiques pour surveiller l'état d'activation de WNK1.

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