Anticorps Monoclonaux Anti-WNK1 pour WB - Q9H4A3

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du WNK1

• WNK1 (Sérine/thréonine-protéine kinase WNK1) est la kinase centrale de la cascade WNK1-SPAK/OSR1, qui est un régulateur critique de la pression artérielle et du volume cellulaire ; il favorise l'augmentation régulée du volume en détectant le stress hyperosmotique et en activant les voies d'afflux ionique. Références associées : PMID:15883153, PMID:17190791, PMID:31656913
• Dans des conditions hyperosmotiques, WNK1 fonctionne comme un capteur d'encombrement moléculaire, subissant une séparation de phase liquide-liquide pour former des compartiments sans membrane qui concentrent WNK1 avec ses substrats OXSR1/OSR1 et STK39/SPAK, améliorant ainsi la signalisation kinase. Références associées : PMID:36318922
• En aval, WNK1 phosphorylie et active OXSR1/OSR1 et STK39/SPAK, qui phosphorylent à leur tour les cotransporteurs d'ions (SLC12A1/NKCC2, SLC12A2/NKCC1, SLC12A5/KCC2, SLC12A6/KCC3) pour réguler le transport du sodium, du potassium et du chlore, contrôlant ainsi le volume cellulaire et la pression artérielle. Références associées : PMID:16263722, PMID:21321328, PMID:19665974
• Au-delà du transport ionique, WNK1 régule l'angiogenèse via OXSR1/OSR1 et STK39/SPAK dans les cellules endothéliales, module l'export d'ARNm en phosphorylant PCF11, régule négativement l'autophagie et est nécessaire pour l'étape d'abscission lors de la mitose. Références associées : PMID:25362046, PMID:29196535, PMID:27911840, PMID:21220314
• WNK1 agit également comme une protéine d'échafaudage indépendamment de son activité kinase : il stabilise le composant EMC2 du complexe membranaire du réticulum endoplasmique et favorise l'activation de SGK1 en le recrutant vers mTORC2 de manière dépendante du chlore. Références associées : PMID:33964204, PMID:36373794
• Un isoforme spécifique du rein, déficient en kinase, de WNK1 fonctionne comme un régulateur dominant négatif de la kinase pleine longueur, jouant un rôle clé dans l'équilibre rénal du sodium et du potassium. Références associées : PMID:14645531
• Au niveau subcellulaire, WNK1 se localise dans le cytoplasme, le noyau et le fuseau mitotique, ce qui est cohérent avec ses rôles dans la signalisation, l'expression des gènes et la division cellulaire.
• WNK1 est largement exprimé, avec les niveaux les plus élevés dans les testicules, le cœur, le rein et le muscle squelettique ; une forte expression est également observée dans les ganglions de la racine dorsale et la moelle épinière. L'isoforme spécifique au rein est restreinte au tube contourné distal et au tube connecteur du néphron.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 1-100 du WNK1 humain. Cette région N-terminale peut être conservée ; la réactivité croisée avec la souris est confirmée. Validez l'anticorps dans votre système modèle spécifique.
• Pour le Western blot, notez le poids moléculaire élevé (~251 kDa). Utilisez un gel SDS-PAGE à faible pourcentage (par exemple, 6-8 %) et des temps de transfert prolongés (par exemple, une nuit à 30 V) pour assurer un transfert efficace des protéines de poids moléculaire élevé.
• Pour les applications ELISA, envisagez d'utiliser le peptide immunogène comme témoin positif pour évaluer la liaison de l'anticorps et établir les conditions de l'essai.

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