Anticorps monoclonal de lapin anti-WIPI1 pour WB et ELISA - Q5MNZ9

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de WIPI1

• WIPI1 est une protéine à répétitions WD qui constitue un élément clé de la machinerie de l’autophagie, en assurant la séquestration du matériel cytoplasmique dans les autophagosomes en vue de sa dégradation lysosomale.

Références associées : PMID:15602573, PMID:20114074, PMID:20484055

• Elle joue un rôle essentiel dans l’autophagie induite par la privation de nutriments et par le calcium, ainsi que dans la mitophagie, et se lie au phosphatidylinositol 3-phosphate (PtdIns3P) pour être recrutée sur les sites d’assemblage des phagophores au niveau du réticulum endoplasmique.

Références associées : PMID:28561066, PMID:31271352, PMID:33499712

• Avec WIPI2, WIPI1 contribue au recrutement du complexe ATG12-ATG5-ATG16L1, nécessaire à l’élongation de la membrane autophagosome.

Référence associée : PMID:28561066

• Elle coopère également avec WDR45/WIPI4 pour faciliter le transfert lipidique médié par ATG2 au niveau des membranes positives pour PI3P.

Référence associée : PMID:31271352

• WIPI1 participe à l’élimination xénophagique de Staphylococcus aureus intracellulaire.

Référence associée : PMID:22829830

• Outre son rôle dans l’autophagie, WIPI1 régule la transcription des enzymes mélanogéniques et la maturation des mélanosomes, et pourrait contrôler le recyclage du récepteur du mannose-6-phosphate.

Références associées : PMID:21317285, PMID:15020712

• Elle se localise dans l’appareil de Golgi, les endosomes, les vésicules recouvertes de clathrine, les membranes préautophagosomales et le cytosquelette.

• WIPI1 est exprimée de manière ubiquitaire, avec des niveaux élevés dans les muscles squelettiques, le cœur, les testicules, le pancréas et le placenta, et son expression est augmentée dans plusieurs tissus tumoraux.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond à la région N-terminale, comprenant les 1 à 100 premiers acides aminés de WIPI1 humaine, ce qui garantit la spécificité de la cible. Validez la réactivité dans le système d’échantillon pertinent à l’aide de contrôles appropriés (par exemple, surexpression ou extinction de l’expression).
• Pour le Western blot, prévoyez une bande proche de 49 kDa. Confirmez la spécificité en utilisant des lysats cellulaires issus de cellules knock-out pour WIPI1 ou de cellules dont l’expression a été réduite par siARN.
• L’optimisation de l’ELISA peut nécessiter l’évaluation de différentes conditions de revêtement et de différentes titrations de l’anticorps. Compte tenu de la réactivité croisée avec la souris et le rat, envisagez d’utiliser cet anticorps pour des études comparatives sur des modèles de rongeurs.
• L’induction de l’autophagie (par exemple, par privation de nutriments ou traitement à la rapamycine) peut augmenter les niveaux de WIPI1, ce qui peut améliorer la sensibilité de détection.

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