Anticorps monoclonal anti-WEE1 pour IHC-P, ELISA - P30291

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de WEE1

• WEE1 (protéine kinase de type Wee1) est une tyrosine kinase nucléaire qui agit comme un régulateur négatif essentiel de la transition du cycle cellulaire G2/M en phosphorylant et en inhibant le complexe cycline B1-CDK1.
  Références associées : PMID:15070733, PMID:7743995, PMID:8348613, PMID:8428596
• Elle phosphoryle spécifiquement CDK1 sur la tyrosine-15, empêchant l’entrée prématurée en mitose ; son activité atteint un pic durant les phases S et G2, puis diminue lorsque les cellules entrent en mitose, en corrélation avec son hyperphosphorylation et sa dégradation ultérieure.
• WEE1 se localise principalement dans le noyau, où elle protège le génome en assurant un moment approprié pour l’entrée en mitose.
• La protéine contient des domaines conservés de kinase, de liaison à l’ATP et de liaison aux métaux, caractéristiques des tyrosine kinases, et son activité est modulée par phosphorylation et ubiquitination.
• Les autres noms de WEE1 comprennent WEE1A, WEE1hu et kinase Wee1A ; l’identifiant du gène humain est 7465.
• Les mots-clés UniProt associés à WEE1 comprennent cycle cellulaire, mitose, noyau, kinase, phosphoprotéine, épissage alternatif et conjugaison à l’ubiquitine, reflétant ses fonctions régulatrices.
• La protéine WEE1 humaine possède un poids moléculaire prédit d’environ 71,6 kDa (UniProt), ce qui est cohérent avec le produit de 72 kDa.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène utilisé est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 1 à 100 de WEE1 humain (NP_003381.1). Cette région N-terminale peut convenir à la détection de la protéine entière et des variants d’épissage, mais une validation dans le système d’échantillons concerné est recommandée.
• Pour les applications en IHC-P, envisagez de tester une gamme de dilutions d’anticorps et de méthodes de récupération antigénique, car le profil de coloration devrait être nucléaire ; la réactivité croisée de l’anticorps avec la WEE1 de souris peut faciliter les études sur des modèles murins.
• Pour l’ELISA, il est recommandé d’optimiser l’antigène de revêtement et les conditions de détection ; l’association avec un anticorps de capture ou de détection approprié peut améliorer la sensibilité du test.
• Étant donné que les niveaux de protéine WEE1 fluctuent au cours du cycle cellulaire, la synchronisation des cultures cellulaires et un prélèvement des échantillons effectué au moment approprié peuvent améliorer la reproductibilité de la détection.

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