Anticorps polyclonal Anti-WDFY4 pour WB, ELISA - Q6ZS81

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de WDFY4

• WDFY4 (protéine 4 contenant le domaine WD répété et le domaine FYVE) est également connue sous le nom de C10orf64 et code pour une grande protéine d'environ 354 kDa contenant des domaines WD répétés et un domaine FYVE.
• Elle joue un rôle essentiel dans la régulation de la présentation croisée des antigènes viraux et tumoraux dans les cellules dendritiques conventionnelles de type 1 (cDC1). Sur le plan mécanistique, elle agit près de la membrane plasmique et interagit avec les membranes endosomales pour favoriser le trafic des antigènes des endosomes vers le cytosol.
• Impliquée dans la survie des lymphocytes B via la régulation de l'autophagie, reliant la réponse immunitaire adaptative aux voies de dégradation cellulaire.
• Se localise dans les endosomes précoces et le réticulum endoplasmique, ce qui est cohérent avec son rôle dans le trafic endosomal des antigènes et la dynamique membranaire.
• Associée à l'épissage alternatif, produisant plusieurs isoformes qui peuvent présenter une diversité fonctionnelle ou spécifique des tissus.
• Contient des répétitions WD, connues pour faciliter les interactions protéine-protéine, et un domaine FYVE qui lie le phosphatidylinositol 3-phosphate, le ciblant vers les membranes endosomales.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre la région N-terminale (acides aminés 1 à 160) de la WDFY4 humaine ; cette région peut être conservée entre les isoformes, mais l'expression spécifique des isoformes doit être prise en compte lors de la validation.
• Pour le Western blot (WB), la protéine entière mesure environ 354 kDa ; utilisez des gels SDS-PAGE à faible pourcentage appropriés, des temps de transfert prolongés et des méthodes de détection à haute sensibilité pour séparer et détecter cette protéine de poids moléculaire élevé.
• Validez la spécificité de l'anticorps dans les types cellulaires humains pertinents connus pour exprimer WDFY4, tels que les cellules dendritiques ou les lignées de lymphocytes B, en utilisant des contrôles positifs et négatifs.
• Pour l'ELISA, optimisez la concentration d'antigène de revêtement et les dilutions d'anticorps en utilisant l'immunogène recombinante ou la protéine native issue de lysats cellulaires humains.
• À noter que cet anticorps est rapporté comme réagissant avec les échantillons humains ; la réactivité croisée avec d'autres espèces n'a pas été testée et doit être déterminée expérimentalement si nécessaire.

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