Anticorps polyclonal de lapin anti-VPS4A pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9UN37

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de VPS4A

• La protéine 4A associée au tri des protéines vacuolaires (VPS4A) est une AAA ATPase qui utilise l'hydrolyse de l'ATP pour désassembler les complexes ESCRT-III, essentiels aux événements de fission membranaire dans la voie endosomale.
• Elle est nécessaire à la formation des corps multivésiculaires (MVB) et au tri des vésicules intraluminales (ILV) ; VPS4A redistribue les composants ESCRT-III dans le cytoplasme pour leur réutilisation, régulant la taille des endosomes, l'organisation du cil primaire et la fermeture de l'enveloppe nucléaire pendant l'anaphase (PubMed:33186545). Références associées : PMID:33186545
• Joue un rôle central dans l'étape d'abscission de la cytodiérèse ; retenu au niveau du corps médian par ZFYVE19/ANCHR et CHMP4C jusqu'à la fin du point de contrôle, la libération de VPS4A déclenche ensuite la scission membranaire (PubMed:24814515). Références associées : PMID:24814515
• Médie la libération exosomique de SDCBP, CD63 et syndécan, reliant la machinerie ESCRT à la biogenèse des exosomes (PubMed:22660413). Références associées : PMID:22660413
• Essentiel pour la cytodiérèse normale des érythroblastes et l'érythropoïèse ; les mutations sont associées à l'anémie dysérythropoïétique congénitale (PubMed:33186543). Références associées : PMID:33186543
• En conjonction avec la machinerie ESCRT, VPS4A participe à des événements de fission membranaire topologiquement similaires qui sont détournés par les virus enveloppés (par exemple le VIH-1) pour leur bourgeonnement.
• Se localise au niveau subcellulaire sur les membranes des endosomes tardifs, le corps médian, le cytoplasme et le fuseau mitotique.
• Il est exprimé de manière ubiquitaire, avec des liens avec des variants pathologiques dont les cataractes, l'anémie hémolytique héréditaire et le handicap intellectuel (comme indiqué dans les mots-clés UniProt).

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond aux résidus 1-120 de la VPS4A humaine, une région N-terminale ; cela peut faciliter la réactivité croisée avec les orthologues de souris et de rat.
• En tant qu'anticorps polyclonal, il offre généralement une détection robuste dans les applications dénaturantes (WB) et natives (IHC-P, IF/ICC) ; cependant, les dilutions de travail optimales doivent être déterminées empiriquement pour chaque essai.
• Pour le Western blot, une bande attendue d'environ 49 kDa est observée ; utilisez des lysats de cellules entières ou de tissus exprimant VPS4A.
• Pour IHC-P et IF/ICC, validez la spécificité avec des contrôles positifs et négatifs appropriés, et optimisez les conditions de récupération d'antigène ou de perméabilisation.
• En ELISA, envisagez d'associer cet anticorps à d'autres anticorps anti-VPS4A pour créer un test sandwich après validation.
• Étant donné que VPS4A se localise au niveau du corps médian pendant la cytodiérèse, la synchronisation des cellules en fin de mitose ou l'enrichissement en structures de corps médian peuvent améliorer la détection pour IF/ICC.
• Comme VPS4A est exprimé de manière ubiquitaire, vérifiez l'efficacité du knock-down ou du knock-out dans les expériences ARNi / CRISPR pour confirmer la spécificité.

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