Anticorps polyclonal de lapin anti-VPS35 pour WB, ELISA - Q96QK1

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la VPS35

• La VPS35 (protéine 35 associée au tri des protéines vacuolaires) est un composant central du complexe de sélection de cargo du rétromère (CSC), essentiel pour empêcher la dégradation lysosomique de protéines de cargo transmembranaires sélectionnées ; elle est nécessaire au transport rétrograde de l'IGF2R et du SLC11A2 des endosomes vers l'appareil de Golgi TGN et à la transcytose pIgR-pIgA. Références associées : PMID:15078903, PMID:15247922, PMID:20164305
• Le CSC du rétromère interagit avec différentes nexines de tri (SNX3, SNX27, SNX-BAR) pour définir des voies de trafic spécialisées ; par exemple, le SNX3-rétromère médie le transport rétrograde endosome-TGN de WLS. Références associées : PMID:30213940
• La VPS35 facilite le recrutement du complexe WASH et de la TBC1D5 sur les membranes endosomales, liant la fonction du rétromère à la polymérisation de l'actine et au cycle des protéines régulatrices. Références associées : PMID:22070227, PMID:28892079, PMID:20923837
• La localisation subcellulaire inclut le cytoplasme, la membrane et les compartiments endosomaux (endosomes précoces et tardifs), ce qui est cohérent avec son rôle dans le trafic intracellulaire.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation (mot-clé « Phosphoprotéine »), ce qui suggère un contrôle régulateur de l'assemblage du rétromère et du tri du cargo.
• L'expression tissulaire est ubiquitaire, avec des niveaux élevés dans le cœur, le cerveau, le placenta, le muscle squelettique, la rate, le thymus, le testicule, l'ovaire, l'intestin grêle, le rein et le côlon.
• Les mutations du gène VPS35 sont associées à la maladie de Parkinson d'apparition tardive autosomique dominante (PARK17, ce qui implique un dysfonctionnement du rétromère dans la neurodégénérescence.
• En outre, la VPS35 joue un rôle dans les interactions hôte-virus ; le CSC du rétromère médie la sortie du papillomavirus humain des endosomes précoces lors de l'infection.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène correspond à la région N-terminale (acides aminés 1-250) de la VPS35 humaine, qui est très conservée ; la réactivité croisée avec la souris est confirmée, et une réactivité avec d'autres espèces est possible compte tenu de l'homologie de séquence.
• Pour le Western blot (WB), une bande d'environ 92 kDa est attendue. Compte tenu de l'expression ubiquitaire de la protéine, des signaux positifs peuvent être attendus dans divers lysats cellulaires humains et de souris (par exemple HeLa, HEK293, ou tissu cérébral de souris) ; validez dans votre système d'échantillon spécifique.
• Pour l'ELISA, envisagez un revêtement direct de la VPS35 recombinante ou des essais de capture ; titrez l'anticorps pour établir les dilutions de travail optimales.
• Pour l'immunofluorescence ou l'immunohistochimie, notez qu'il s'agit d'un anticorps polyclonal ; une validation supplémentaire peut être nécessaire en raison d'une éventuelle réactivité croisée avec d'autres membres de la famille VPS ou d'autres composants du rétromère.
• Conservez à -20°C en aliquotes et évitez les cycles répétés de congélation-décongélation pour préserver l'activité.

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