Anticorps polyclonal anti-VPS28 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q9UK41

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de VPS28

• VPS28 est l'homologue humain de la protéine Vps28 de levure, un composant central du complexe ESCRT-I (endosomal sorting complexes required for transport), également appelé sous-unité VPS28 du complexe ESCRT-I.
• En tant que composant d'ESCRT-I, VPS28 agit comme régulateur du trafic vésiculaire, et médie spécifiquement le tri des protéines membranaires ubiquitinées vers les corps multivésiculaires (MVB) pour leur dégradation lysosomique.
• Les études de localisation subcellulaire indiquent que VPS28 est associé à la membrane cellulaire et à la membrane des endosomes tardifs, ce qui correspond à son rôle dans le tri des cargaisons endosomiques.
• La protéine subit une acétylation et est sujette à l'épissage alternatif, ce qui contribue à sa diversité fonctionnelle ; elle a été identifiée dans des analyses protéomiques et constitue un composant de référence du protéome.
• Le poids moléculaire prédit de VPS28 est d'environ 25 kDa (UniProt : 25425 Da), ce qui correspond à la bande observée lors des applications Western blot.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène comprend la forme entière de VPS28 humaine (acides aminés 1–221), ce qui peut offrir une couverture épitopique étendue. Pour le Western blot, il est recommandé de commencer avec une gamme de dilution standard (par exemple 1:500–1:2000) et de valider en utilisant des lysats de lignées cellulaires humaines, murines ou de rat connues pour exprimer VPS28.
• Pour l'IF/ICC, optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation, et incluez des contrôles appropriés pour confirmer la spécificité de la coloration de la membrane endosomique.
• En ELISA, le couplage de cet anticorps polyclonal avec un anticorps de détection adapté peut améliorer la sensibilité ; déterminez empiriquement les concentrations d'antigène de revêtement et les titres d'anticorps.
• Compte tenu de la réactivité croisée de l'anticorps avec la souris et le rat, il est adapté pour des études comparatives entre ces espèces, mais vérifiez systématiquement sa performance dans votre système d'échantillons spécifique.

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