Anticorps monoclonal lapin anti-VPS18 pour WB et ELISA - Q9P253

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de VPS18

• VPS18 (homologue de la protéine 18 associée au tri vacuolaire) est une sous-unité core de 110 kDa des complexes VPS-C, essentielle pour l'ancrage et la fusion membranaire dans les voies endocytique et autophagique.
• Il agit comme composant central des complexes d'ancrage endosomal HOPS et CORVET, qui médient la fusion membranaire dépendante des SNARE et la conversion Rab5-vers-Rab7 lors de la maturation des endosomes (PubMed:11382755, 23351085, 24554770). Références associées : PMID:11382755, PMID:23351085, PMID:24554770
• VPS18 est requis pour la fusion des endosomes et des autophagosomes avec les lysosomes, une étape critique de la dégradation terminale dans les voies endocytique et autophagique (PubMed:25783203). Références associées : PMID:25783203
• La protéine se localise sur les endosomes tardifs, les lysosomes, les endosomes précoces, les autophagosomes et les vésicules à clathrine, ce qui reflète son rôle étendu dans le trafic intracellulaire.
• VPS18 contient des domaines en bobine torsadée et un motif doigt de zinc, ce qui indique des fonctions dans les interactions protéine-protéine et la coordination des métaux ; il est régulé par des modifications post-traductionnelles dont l'acétylation et la phosphorylation.
• Il est exprimé de manière ubiquitaire, avec des niveaux les plus élevés dans le cœur, ce qui suggère une implication variable selon les tissus mais généralisée dans le transport vésiculaire.
• VPS18 contribue également au développement des dendrites dans les cellules de Purkinje (par similarité), ce qui l'implique dans le trafic membranaire neuronal.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour le Western blot, une bande spécifique proche de 110 kDa est attendue ; optimisez les conditions de SDS-PAGE et de transfert pour les protéines de haut poids moléculaire.
• L'immunogène correspond aux acides aminés 1-100 de la protéine VPS18 humaine ; envisagez l'utilisation d'un blocage par peptide ou de contrôles knock-out pour confirmer la spécificité.
• Pour les applications ELISA, le peptide d'immunisation peut servir de contrôle positif ; les formats d'ELISA indirect sont recommandés.
• Validez l'anticorps sur des lignées cellulaires humaines avec une expression connue de VPS18 ; l'enrichissement des fractions endosomales/lysosomales peut améliorer la détection.
• En tant qu'anticorps monoclonal de lapin, ce réactif doit offrir une haute affinité et une performance constante entre lots ; les dilutions optimales et les paramètres d'incubation doivent être déterminés de manière empirique.

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