Anticorps polyclonal de lapin anti-Facteur de von Willebrand (VWF) pour WB/IHC-P/ELISA - P04275

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du facteur de von Willebrand

• Le facteur de von Willebrand (VWF) est une glycoprotéine plasmatique multimérique essentielle à l'hémostase, servant de pont moléculaire entre le collagène sous-endothélial et le récepteur GPIb-IX-V des plaquettes pour favoriser l'adhésion plaquettaire aux sites de lésion vasculaire.
• Le VWF fonctionne également comme chaperonne pour le facteur VIII de coagulation, stabilisant sa structure hétérodimérique et le protégeant contre une clairance prématurée du plasma.
• Encodé par le gène VWF (GeneID : 7450) sur le chromosome 12, la protéine est synthétisée sous forme de préprotéine de 2813 acides aminés qui subit un traitement post-traductionnel extensif, incluant la glycosylation et la multimérisation.
• La protéine est sécrétée et se localise à l'extérieur de la cellule, où elle fait partie de la matrice extracellulaire et circule dans le plasma.
• Le VWF contient plusieurs domaines fonctionnels, notamment les domaines A qui médient les interactions avec la glycoprotéine Ib plaquettaire et le collagène.
• Les mutations du gène VWF sont associées à la maladie de von Willebrand (VWD), un trouble hémorragique caractérisé par une adhésion plaquettaire défectueuse et des niveaux réduits de facteur VIII.
• L'épissage alternatif du transcrit VWF génère plusieurs isoformes, bien que la signification fonctionnelle de nombreuses variantes reste à l'étude.

Guidance expérimentale et conseils techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 2645-2813, une région C-terminale du VWF. Cette séquence peut permettre de détecter toutes les isoformes majeures dans les applications de Western blot (WB) dénaturant.
• Pour l'IHC-P, les méthodes de récupération d'antigène et la dilution de l'anticorps doivent être optimisées, car le VWF est abondamment exprimé dans l'endothélium vasculaire et les plaquettes.
• Dans les ELISA, envisagez d'associer cet anticorps polyclonal à un anticorps de capture ciblant un épitope non chevauchant pour éviter toute compétition.
• En raison du poids moléculaire élevé (309 kDa) du VWF mature, utilisez des gels SDS-PAGE à faible pourcentage (5–6 %) et des temps de transfert prolongés pour assurer une détection efficace.
• Compte tenu de la nature multimérique du VWF, l'utilisation d'agents réducteurs (par ex. DTT) est recommandée pour résoudre les formes monomériques en WB ; les conditions non réductrices peuvent révéler des échelles multimériques.

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