Anticorps monoclonal de lapin anti-vinculine [validé par KD] pour WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P18206

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la vinculine

• La vinculine est une protéine de liaison aux filaments d'actine (F-actine) codée par le gène VCL ; un isoforme spécifique du muscle, la métavinculine (MV), est généré par épissage alternatif.
• Elle est essentielle à la fois pour l'adhésion cellule-matrice et l'adhésion cellule-cellule, régulant l'expression de l'E-cadhérine à la surface cellulaire et améliorant la mécanosensibilité du complexe E-cadhérine.
• La vinculine se localise dans de multiples structures sous-cellulaires, notamment les jonctions adhérentes, les adhérences focales, le cytosquelette, le sarcolemme, les podosomes et le cytoplasme périnucléaire.
• La protéine est soumise à des modifications post-traductionnelles : acétylation, phosphorylation et palmitoylation, qui modulent probablement son activité et son association à la membrane.
• Les variants pathogènes de VCL sont associés aux cardiomyopathies ; la métavinculine est spécifiquement impliquée dans des troubles musculaires tels que la cardiomyopathie dilatée (CMD1W) et la cardiomyopathie hypertrophique (CMH15).
• La vinculine joue un rôle dans la morphologie et la locomotion cellulaires, contribuant au remodelage dynamique du cytosquelette d'actine lors de la migration.
• Des études structurales indiquent que la vinculine contient des domaines répétés qui permettent des interactions avec de multiples partenaires de liaison, servant d'échafaudage moléculaire au niveau des sites d'adhésion.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 1 à 258 de la vinculine humaine (région N-terminale) ; par conséquent, l'anticorps peut détecter la vinculine pleine longueur (~124 kDa) et l'isoforme métavinculine (~150 kDa) dans des échantillons musculaires.
• Pour le Western blot, nous recommandons d'utiliser des marqueurs de taille et des contrôles de charge appropriés ; envisagez d'utiliser des lysats de lignées cellulaires humaines, de souris ou de rat exprimant la vinculine. La validation par KD confirme la spécificité, mais les utilisateurs finaux doivent la vérifier dans leur propre système expérimental.
• En immunofluorescence et en immunohistochimie, la vinculine apparaît généralement sous forme de points distincts au niveau des adhérences focales et de bandes continues au niveau des jonctions cellule-cellule. Incluez des contrôles négatifs (par exemple, des cellules avec un knock-down de vinculine) et une co-coloration avec des marqueurs d'adhésion pour confirmer la localisation.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé dans les formats direct et sandwich ; optimisez les concentrations de revêtement et les conditions de détection de manière empirique.

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